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目的:
建立苗医药中冷经病动物模型,用现代研究方法和技术揭示苗医药相关记载中冷经病蕴藏的科学内涵,并在此基础上,用苗医药记载中对冷经病有治疗作用的淫羊藿及苗药制剂仙灵骨葆胶囊来评价冷经病动物模型,以及对补火药淫羊藿治疗冷经病的作用进行初步的探讨研究。
方法:
1.苗医药中冷经病动物模型的建立部分
(1)方法考察:将实验动物随机分为正常组、氢-丙组、寒-冷组。氢-丙模型组采用丙硫氧嘧啶+氯化可的松,寒-冷模型灌胃寒凉汤+冷水刺激,正常对照组正常饲养。实验过程中观察记录动物一般状态、体重、肛温等,14天后,取材检测UA、GLU、ALB、LDH、CHDL、TG、T等生化指标。
(2)冷经病动物模型的建立:通过氯化可的松加寒冷刺激的方法建立冷经病实验动物模型,并设置空白对照组,然后分别在造模结束后及造模结束后两周对各组大鼠进行取材检测评价分析,具体检测从以下几方面进行:①观察记录实验动物在模型制备过程中的一般状态,记录实验大鼠自主活动情况,体重变化情况,肛温、趾温变化情况,并进行记录,取实验动物血清:②实验动物下丘脑-垂体-靶腺轴相关指标;③物质能量代谢系统;④免疫系统:⑤环核苷酸系统,⑥脏器系数;⑦血常规及凝血功能,最后对所得数据用SPSS21.0进行统计分析得出结论。
2.有关苗药及其制剂对冷经病动物极型干预部分:
选用SD大鼠60只,分别为模型组、粗毛组、巫山组、黔岭组、仙灵骨葆胶囊组,加之空白对照组共计6组。然后复制上述方法建立冷经病动物模型,开始建模一周后,分别以粗毛淫羊藿、巫山淫羊藿、黔岭淫羊藿水煎液、仙灵骨葆胶囊混悬液进行灌胃治疗,空白组和模型组大鼠在此期间灌胃同等体积的饮用水。在治疗给药结束后对各组大鼠同时进行检测评价分析,具体检测项目同上,最后所得数据用SPSS21.0进行统计分析得出结论。
结果:
1.苗医药中冷经病动物模型的建立部分
(1)方法考察
造模结束后,氢-丙模型组动物,形体消瘦,精神状态萎靡,毛稍竖立,肛温下降,弓背。寒-冷模型组实验动物精神状态良好,仅雄性大鼠形体消瘦稍明显,时而出现明显的大便不成形;两组模型动物雄性动物体重显著性下降(P<0.05),雌性动物体重变化不明显或略有下降趋势(P>0.05);氢-丙模型组、寒-冷模型组模型动物肛温均显著性下降(P<0.05);本次造模结果显示,氢-丙组动物模型血清中UA、GLU、ALB含量均呈降低趋势,CHDL、TG、TP含量均升高,但但仅LDH降低有显著性差异(P<0.05);寒冷组动物模型血清UA、GLU、ALB、CHDL、TP含量均呈上升趋势,LDH和TG呈下降趋势,但与空白组比较,实验结果的差异均没有显著性意义(P>0.05)。
(2)冷经病动物模型的建立
①一般状态:冷经病模型组大鼠一般状态的恶化趋势较为猛烈,均出现了神状态萎靡,反应呆滞,形体消瘦,肛温下降,弓背,扎堆明显,时有大便不成形,便溏情况;与空白组相比,模型组大鼠体重、自主活动、肛温、趾温下降明显(P<0.05)。②下丘脑-垂体-靶腺轴:模型大鼠体内T3、TRH、CORT、17-OHCS、E2、T含量降低(P<0.05),T4值明显升高(P<0.05)。③物质能量代谢系统:TC、TG、ALB、TP、UA含量降低(P<0.05),LDH、LAC明显升高(P<0.05)。④免疫系统:IgG、C3含量降低(P<0.05),IgM明显升高(P<0.05).⑤环核苷酸系统:cAMP、cAMP/cGMP含量降低(P<0.05),cGMP明显升高(P<0.05)。⑥脏器指数:肝脏系数、脾脏系数、胸腺系数、睾丸系数值降低(P<0.05),肾脏系数、肾上腺系数、卵巢系数明显升高(P<0.05);⑦其他:血常规中LYM%值降低(P<0.05),凝血PT、TT值明显升高(P<0.05);对模型动物体内Glu、NO、C4、WBC、RBC、HGB、PLT值无显著性变化(P>0.05)。
去除造模因素14天后,模型组一般状态较好转,对外反应较迟饨。与空白对照组大鼠相比,模型组大鼠体重、自主活动、趾温仍降低明显(P<0.05),肛温无显著性变化(P>0.05),模型组大限体内T3、T4、IgM、脾脏系数、胸腺系数值明显升高(P<0.05),TRH、17-OHCS、T、TG、UA、LDH、IgG、cAMP、cAMP/cGMP、睾丸系数、HGB、PLT、TT值明显降低(P<0.05),CORT、E2、TC、ALB、TP、C3、肝脏系数、LYM%、LAC、cGMP、肾脏系数、肾上腺系数、卵巢系数、PT、Glu、NO、C4、WBC、RBC值无显著性变化(P>0.05)。
2.有关苗药及其制剂对冷经病动物模型干预部分
①粗毛淫羊藿能改善冷经病模型组大鼠一般状态,能减缓模型大鼠体重、自主活动、肛温、趾温下降趋势,能调节冷经病模型大鼠体内T3、CORT、TC、TG、TP、UA、Glu、LDH、IgM、IgG、C4、cGMP、cAMP/cGMP、肝脏系数、脾脏系数、肾脏系数、肾上腺系数、胸腺系数、睾丸系数、卵巢系数、PT、TT的异常偏高或偏低(P<0.05),对体内T4、TRH、CORT、17-OHCS、E2、T、ALB、LAC、cAMP、LYM%、WBC、RBC、HGB、PLT的值无明显改善作用(P>0.05);②巫山淫羊藿能改善冷经病模型组大鼠一般状态,能减缓模型大鼠体重、肛温下降趋势,能改善冷经病模型大鼠体内T3、T4、TG、ALB、TP、UA、LDH、IgG、cGMP、cAMP/cGMP、肾上腺系数、胸腺系数、PLT、PT、TT的异常(P<0.05);对模型大鼠的自主活动、趾温、体内TRH、CORT、17-OHCS、E2、T、TC、LAC、Glu、IgM、C4、cAMP、肝脏系数、脾脏系数、肾脏系数、睾丸系数、卵巢系数、LYM%、WBC、RBC、HGB的值无明显改善作用(P>0.05);③黔岭淫羊藿能改善冷经病模型组大鼠一般状态,能减缓模型大鼠体重、肛温、趾温下降趋势,能明显减缓冷经病模型大鼠体内T4、CORT、17-OHCS、TC、TG、ALB、TP、Glu、LDH、IgM、IgG、C4、肝脏系数、肾脏系数、肾上腺系数、睾丸系数、卵巢系数、PT、TT的变化趋势(P<0.05),对模型大鼠自主活动、体内T3、TRH、CORT、UA、E2、T、LAC、cAMP、cGMP、cAMP/cGMP、脾脏系数、胸腺系数、LYM%、WBC、RBC、HGB、PLT值的异常偏高或偏低,无明显改善作用(P>0.05);④仙灵骨葆胶囊组大鼠一般状态相比较与极型组有较大的改善,相比较与模型组,仙灵骨葆胶囊组大鼠体重、肛温,体内T3、T4、CORT、E2、TC、TG、ALB、TP、UA、Glu、LDH、LAC、IgM、IgG、cGMP、cAMP/cGMP、肝脏系数、肾脏系数、肾上腺系数、脾脏系数、胸腺系数、PLT值均得利明显改善(P<0.05),基本恢复到正常状态,对模型大鼠自主活动、趾温体内17-OHCS、C4、TRH、CORT、T、cAMP、睾丸系数、卵巢系数、LYM%、WBC、RBC、HGB、PT、TT的异常变化无明显改善作用(P>0.05)。
结论:
基于本实验结果,氧化可的松加寒冷刺激的方法可建立较稳定的冷经病动物模型,并存在内分泌系统、物质能量代谢系统、免疫系统、环核苷酸系统等病理变化。粗毛淫羊藿、巫山淫羊藿、黔岭淫羊藿、仙灵骨葆胶囊能不同程度改善冷经病模型大鼠各项症状指标,其机制可能与调节内分泌系统、物质能量代谢系统、免疫系统、环核苷酸系统等多个系统有关。
建立苗医药中冷经病动物模型,用现代研究方法和技术揭示苗医药相关记载中冷经病蕴藏的科学内涵,并在此基础上,用苗医药记载中对冷经病有治疗作用的淫羊藿及苗药制剂仙灵骨葆胶囊来评价冷经病动物模型,以及对补火药淫羊藿治疗冷经病的作用进行初步的探讨研究。
方法:
1.苗医药中冷经病动物模型的建立部分
(1)方法考察:将实验动物随机分为正常组、氢-丙组、寒-冷组。氢-丙模型组采用丙硫氧嘧啶+氯化可的松,寒-冷模型灌胃寒凉汤+冷水刺激,正常对照组正常饲养。实验过程中观察记录动物一般状态、体重、肛温等,14天后,取材检测UA、GLU、ALB、LDH、CHDL、TG、T等生化指标。
(2)冷经病动物模型的建立:通过氯化可的松加寒冷刺激的方法建立冷经病实验动物模型,并设置空白对照组,然后分别在造模结束后及造模结束后两周对各组大鼠进行取材检测评价分析,具体检测从以下几方面进行:①观察记录实验动物在模型制备过程中的一般状态,记录实验大鼠自主活动情况,体重变化情况,肛温、趾温变化情况,并进行记录,取实验动物血清:②实验动物下丘脑-垂体-靶腺轴相关指标;③物质能量代谢系统;④免疫系统:⑤环核苷酸系统,⑥脏器系数;⑦血常规及凝血功能,最后对所得数据用SPSS21.0进行统计分析得出结论。
2.有关苗药及其制剂对冷经病动物极型干预部分:
选用SD大鼠60只,分别为模型组、粗毛组、巫山组、黔岭组、仙灵骨葆胶囊组,加之空白对照组共计6组。然后复制上述方法建立冷经病动物模型,开始建模一周后,分别以粗毛淫羊藿、巫山淫羊藿、黔岭淫羊藿水煎液、仙灵骨葆胶囊混悬液进行灌胃治疗,空白组和模型组大鼠在此期间灌胃同等体积的饮用水。在治疗给药结束后对各组大鼠同时进行检测评价分析,具体检测项目同上,最后所得数据用SPSS21.0进行统计分析得出结论。
结果:
1.苗医药中冷经病动物模型的建立部分
(1)方法考察
造模结束后,氢-丙模型组动物,形体消瘦,精神状态萎靡,毛稍竖立,肛温下降,弓背。寒-冷模型组实验动物精神状态良好,仅雄性大鼠形体消瘦稍明显,时而出现明显的大便不成形;两组模型动物雄性动物体重显著性下降(P<0.05),雌性动物体重变化不明显或略有下降趋势(P>0.05);氢-丙模型组、寒-冷模型组模型动物肛温均显著性下降(P<0.05);本次造模结果显示,氢-丙组动物模型血清中UA、GLU、ALB含量均呈降低趋势,CHDL、TG、TP含量均升高,但但仅LDH降低有显著性差异(P<0.05);寒冷组动物模型血清UA、GLU、ALB、CHDL、TP含量均呈上升趋势,LDH和TG呈下降趋势,但与空白组比较,实验结果的差异均没有显著性意义(P>0.05)。
(2)冷经病动物模型的建立
①一般状态:冷经病模型组大鼠一般状态的恶化趋势较为猛烈,均出现了神状态萎靡,反应呆滞,形体消瘦,肛温下降,弓背,扎堆明显,时有大便不成形,便溏情况;与空白组相比,模型组大鼠体重、自主活动、肛温、趾温下降明显(P<0.05)。②下丘脑-垂体-靶腺轴:模型大鼠体内T3、TRH、CORT、17-OHCS、E2、T含量降低(P<0.05),T4值明显升高(P<0.05)。③物质能量代谢系统:TC、TG、ALB、TP、UA含量降低(P<0.05),LDH、LAC明显升高(P<0.05)。④免疫系统:IgG、C3含量降低(P<0.05),IgM明显升高(P<0.05).⑤环核苷酸系统:cAMP、cAMP/cGMP含量降低(P<0.05),cGMP明显升高(P<0.05)。⑥脏器指数:肝脏系数、脾脏系数、胸腺系数、睾丸系数值降低(P<0.05),肾脏系数、肾上腺系数、卵巢系数明显升高(P<0.05);⑦其他:血常规中LYM%值降低(P<0.05),凝血PT、TT值明显升高(P<0.05);对模型动物体内Glu、NO、C4、WBC、RBC、HGB、PLT值无显著性变化(P>0.05)。
去除造模因素14天后,模型组一般状态较好转,对外反应较迟饨。与空白对照组大鼠相比,模型组大鼠体重、自主活动、趾温仍降低明显(P<0.05),肛温无显著性变化(P>0.05),模型组大限体内T3、T4、IgM、脾脏系数、胸腺系数值明显升高(P<0.05),TRH、17-OHCS、T、TG、UA、LDH、IgG、cAMP、cAMP/cGMP、睾丸系数、HGB、PLT、TT值明显降低(P<0.05),CORT、E2、TC、ALB、TP、C3、肝脏系数、LYM%、LAC、cGMP、肾脏系数、肾上腺系数、卵巢系数、PT、Glu、NO、C4、WBC、RBC值无显著性变化(P>0.05)。
2.有关苗药及其制剂对冷经病动物模型干预部分
①粗毛淫羊藿能改善冷经病模型组大鼠一般状态,能减缓模型大鼠体重、自主活动、肛温、趾温下降趋势,能调节冷经病模型大鼠体内T3、CORT、TC、TG、TP、UA、Glu、LDH、IgM、IgG、C4、cGMP、cAMP/cGMP、肝脏系数、脾脏系数、肾脏系数、肾上腺系数、胸腺系数、睾丸系数、卵巢系数、PT、TT的异常偏高或偏低(P<0.05),对体内T4、TRH、CORT、17-OHCS、E2、T、ALB、LAC、cAMP、LYM%、WBC、RBC、HGB、PLT的值无明显改善作用(P>0.05);②巫山淫羊藿能改善冷经病模型组大鼠一般状态,能减缓模型大鼠体重、肛温下降趋势,能改善冷经病模型大鼠体内T3、T4、TG、ALB、TP、UA、LDH、IgG、cGMP、cAMP/cGMP、肾上腺系数、胸腺系数、PLT、PT、TT的异常(P<0.05);对模型大鼠的自主活动、趾温、体内TRH、CORT、17-OHCS、E2、T、TC、LAC、Glu、IgM、C4、cAMP、肝脏系数、脾脏系数、肾脏系数、睾丸系数、卵巢系数、LYM%、WBC、RBC、HGB的值无明显改善作用(P>0.05);③黔岭淫羊藿能改善冷经病模型组大鼠一般状态,能减缓模型大鼠体重、肛温、趾温下降趋势,能明显减缓冷经病模型大鼠体内T4、CORT、17-OHCS、TC、TG、ALB、TP、Glu、LDH、IgM、IgG、C4、肝脏系数、肾脏系数、肾上腺系数、睾丸系数、卵巢系数、PT、TT的变化趋势(P<0.05),对模型大鼠自主活动、体内T3、TRH、CORT、UA、E2、T、LAC、cAMP、cGMP、cAMP/cGMP、脾脏系数、胸腺系数、LYM%、WBC、RBC、HGB、PLT值的异常偏高或偏低,无明显改善作用(P>0.05);④仙灵骨葆胶囊组大鼠一般状态相比较与极型组有较大的改善,相比较与模型组,仙灵骨葆胶囊组大鼠体重、肛温,体内T3、T4、CORT、E2、TC、TG、ALB、TP、UA、Glu、LDH、LAC、IgM、IgG、cGMP、cAMP/cGMP、肝脏系数、肾脏系数、肾上腺系数、脾脏系数、胸腺系数、PLT值均得利明显改善(P<0.05),基本恢复到正常状态,对模型大鼠自主活动、趾温体内17-OHCS、C4、TRH、CORT、T、cAMP、睾丸系数、卵巢系数、LYM%、WBC、RBC、HGB、PT、TT的异常变化无明显改善作用(P>0.05)。
结论:
基于本实验结果,氧化可的松加寒冷刺激的方法可建立较稳定的冷经病动物模型,并存在内分泌系统、物质能量代谢系统、免疫系统、环核苷酸系统等病理变化。粗毛淫羊藿、巫山淫羊藿、黔岭淫羊藿、仙灵骨葆胶囊能不同程度改善冷经病模型大鼠各项症状指标,其机制可能与调节内分泌系统、物质能量代谢系统、免疫系统、环核苷酸系统等多个系统有关。