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S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmetionine，SAM)是广泛存在于生物体内的重要代谢中间物质，在体内参与DNA甲基化、蛋白质甲基化、多胺合成等众多的生物化学反应。在生物体内，S-腺苷甲硫氨酸合成酶(S-adenosylmetionine synthetase，EC2．5．1．6)催化ATP和甲硫氨酸形成S-腺苷甲硫氨酸。本文参考苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)基因组中S-腺苷甲硫氨酸合成酶序列信息设计引物，通过PCR技术从芽孢杆菌属12株菌中扩增得到8个菌株的SAM合成酶基因片段，分别插入大肠杆菌融合表达载体pGEX-6p-1构建了8个重组表达载体pGEX-sam2，pGEX-sam5，pGEX-sam7，pGEX-sam8，pGEX-sam9，pGEX-sam10，pGEX-sam11，pGEX-sam12，序列分析显示sam2，sam5，sam7，sam8，sam9，sam10，sam11，sam12与苏云金芽孢杆菌S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的同源性都大于97％，与大肠杆菌S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的同源性都大于63％。分别将所构建的SAM合成酶表达载体转入大肠杆菌(Escherichia coli)DH5a，成功表达了sam2，sam5，sam7，sam10与sam11。通过亲和层析纯化出SAM2，SAM5，SAM7，S_AM10与SAM11。SDS-PAGE分析显示SAM2，SAM5，SAM7，SAM10与SAM11分子量均为43kD。通过纸层析与HPLC分析了SAM2，SAM5，SAM7，SAM10与SAM11在体外催化形成SAM的活性。结果显示：SAM2，SAM5，SAM7，SAM10与SAM11在体外都可以催化ATP和甲硫氨酸形成S-腺苷甲硫氨酸，其中SAM7的活性比SAM2，SAM5，SAM10与SAM11高4倍。通过定点诱变将SAM7的104位的G突变为Ⅰ，得到突变子sam7m，并将sam7m转入大肠杆菌，成功表达了sam7m，通过纸层析比较了sam7m与sam7的活性。结果显示：sam7突变为sam7m后，纸层析检测不到sam7m的催化催化ATP和甲硫氨酸形成S-腺苷甲硫氨酸的活性，说明G104与其活性中心有关。