【摘 要】
：
HSP70和HSP90在细胞内许多信号转导途径中起到十分重要的作用。研究表明在细胞应激时,HSP70或HSP90与蛋白激酶B(PKB)的结合对PKB的活性调节有至关重要的影响,但HSP70和HSP90
论文部分内容阅读
HSP70和HSP90在细胞内许多信号转导途径中起到十分重要的作用。研究表明在细胞应激时,HSP70或HSP90与蛋白激酶B(PKB)的结合对PKB的活性调节有至关重要的影响,但HSP70和HSP90与PKB之间如何发生相互作用的分子机制仍不清楚。我们给予瞬时转染PKB的HEK293T细胞短暂热休克刺激,以PKB为诱饵蛋白运用PULL-DOWN技术检测HSP90和/或HSP70与PKB的相互作用,并采用格尔德霉素(HSP90特异性抑制剂)处理上述细胞。结果发现:HSP90和HSP70均与PKB发生相互作用,当格尔德霉素抑制HSP90与PKB的结合时,PKB与HSP70的相互作用显著增强。由此我们推测:在HSP90被抑制的细胞内,细胞应激反应(如热休克)可由HSP70与PKB的结合量增加而发生补偿。但反之如果将HSP70与PKB的结合抑制后,PKB与HSP90的结合是否同样可发生补偿效应值得我们进一步研究。由于目前缺乏理想的HSP70特异性抑制剂,我们将HSP70基因中的蛋白结合域(PBD)缺失,构建HSP70的两种缺失突变体,其中一种只含HSP70的ATP域,另一种含HSP70-ATP域和CT域,使其失去与蛋白激酶B结合的功能。经双酶切及DNA测序鉴定后,两种真核表达重组体均成功构建,分别命名为truncated-ATP、truncated-ATP-CT。我们将这两种真核表达重组体瞬时转染HEK293T细胞,实验分组为:(1)未转染组;(2)全长HSP70转染组;(3)truncated-ATP转染组;(4)truncated-ATP-CT转染组。WESTERN-BLOT检测各组HSP70表达水平,结果表明:我们所构建的这两种重组体均在HEK293T细胞内成功表达。这将为后期进一步阐明HSP70/HSP90与PKB的相互作用的分子机制奠定实验基础。
其他文献
Diacylgycerol acyltransferase (DGAT) plays a key modulatory role in animal fat deposition.Intramuscular fat (IMF) content and backfat thickness (BFT) were i
针对真空玻璃和中空玻璃在制备和应用过程中边缘部位产生应力和变形并导致边缘密封失效这一问题，建立了力学模型，分别分析了内、外片玻璃不同温差、环境温度、大气压作用下
湖泊生态系统健康已经是生态学和社会学研究的热点问题,现阶段的湖泊生态系统的健康是一个涵盖自然与社会的综合性的概念,即湖泊生态系统既能有满足人类社会合理要求的能力又可以维持本身生态的生存和发展。如何科学的对湖泊生态系统进行健康评估,对当地社会可持续发展及流域管理具有重要的意义。本文引入熵理论和灰色波形模型,以白洋淀为背景探究湖泊生态系统健康评估,研究内容如下:(1)基于薛定谔关于熵变与生命体关系的理
全国病险小型水库数量巨大，在同一水库多种病险同时存在，所以中小型水库的除险加固工作变得更加艰巨而复杂。在除险加固过程中应用了一种凹型复合实用堰，凹型复合实用堰作为复合
极低密度脂蛋白受体(very low density lipoprotein receptor,VLDLR)是低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor,LDLR)超家族成员之一。由于第16号外显子的选择性
贯流泵是适用于大流量、低扬程的一种经济泵型,具有装置效率高,水力损失小,过流能力大,机组结构紧凑,水工布置简单,土建和运行费用低等优点。南水北调东线工程中许多泵站采用
本文主要讲述磨边机生产过程中影响玻璃对角线的因素，着重分析了偏差的形成与设备的关系。
因缺少充分的数据资料，用传统的方法很难进行地下水管理方面的研究。因此，本文在前人研究的基础上，用两种方案相组合的方法，运用Visual MODFLOW、GIS、Surfer软件，从水质和水量的
本文介绍了真空玻璃的技术特点，真空玻璃应用于低温冷柜和冷藏柜时的节能效果以及防结露效果，试验证明，真空玻璃门节能效果十分显著，应大力推广真空玻璃在冷链行业的应用。