【摘 要】
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【目的】复制SNI大鼠神经病理性疼痛-抑郁共病模型,通过检测脊髓背角内G蛋白偶联受体激酶2（GRK2）的蛋白表达水平,明确GRK2是否参与神经病理性疼痛-抑郁共病,通过检测海马内IL-1β、IL-10的表达水平,初步探讨神经炎症因子在其共病状态中的作用;明确GRK2是否参与脉冲射频背根神经节改善神经病理性疼痛-抑郁共病,进一步探讨脊髓背角内GRK2-海马内IL-1β、IL-10信号途径在脉冲射频背
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【目的】复制SNI大鼠神经病理性疼痛-抑郁共病模型,通过检测脊髓背角内G蛋白偶联受体激酶2（GRK2）的蛋白表达水平,明确GRK2是否参与神经病理性疼痛-抑郁共病,通过检测海马内IL-1β、IL-10的表达水平,初步探讨神经炎症因子在其共病状态中的作用;明确GRK2是否参与脉冲射频背根神经节改善神经病理性疼痛-抑郁共病,进一步探讨脊髓背角内GRK2-海马内IL-1β、IL-10信号途径在脉冲射频背根神经节改善神经病理性疼痛-抑郁共病的作用。【方法】选取健康成年雄性Wistar大鼠120只,采用随机数字表法分成6组,每组20只:假手术组（Sham组）、保留神经损伤组（Spared nerve injury,SNI组）、假脉冲射频治疗组（Sham pulsed radiofrequency,SPRF组）、脉冲射频治疗组（Pulsed radiofrequency,PRF组）、脉冲射频+鞘内注射GRK2反义寡核苷酸（Antisense Oligodeoxynucleotides）组（PRF+AS-ODN组）、脉冲射频+鞘内注射GRK2错义寡核苷酸（Mismatch Oligodeoxynucleotides）组（PRF+MM-ODN组）。除Sham组仅分离并暴露大鼠左后肢坐骨神经外,其余五组均复制SNI模型;PRF+AS-ODN组和PRF+MM-ODN组在制模的同时进行鞘内置管;制模后第7天PRF组、PRF+AS-ODN组、PRF+MM-ODN组均进行脉冲射频背根神经节治疗,SPRF组仅放置射频电极而不进行脉冲治疗;PRF+AS-ODN组、PRF+MM-ODN组在脉冲射频治疗后当天及随后连续2天分别给予鞘内注射AS-ODN和MM-ODN 40μg,每天注射一次;所有大鼠于SNI模型前及制备后的第1、3、7、8、9、14、21、28、35、42天进行50%机械痛阈（Mechanical paw withdrawal threshold,MWT）的测量;制模后第21、42天,采用免疫荧光、Western-blot检测脊髓背角内GRK2的表达水平以及免疫荧光、ELISA和Western-blot检测海马内IL-1β、IL-10的表达水平。【结果】除了Sham组,其余五组大鼠在SNI术后各时间点的MWT均较SNI前明显降低（P<0.05）。在PRF治疗后各时间点,与SNI组、SPRF组和PRF+AS-ODN组比较,PRF组和PRF+MM-ODN组的MWT上升（P<0.05）,而PRF+AS-ODN组与SNI组、SPRF组的MWT差异无统计学意义（P>0.05）。与Sham组比较,在SNI术后第42天,其余5组大鼠的强迫游泳不动时间均明显延长,糖水偏爱率明显下降（P<0.05）。与SNI组、SPRF组和PRF+AS-ODN组比较,PRF组和PRF+MM-ODN组大鼠的强迫游泳不动时间均明显缩短,糖水偏爱率明显升高（P<0.05）。在SNI术后第21天和42天,与PRF组和PRF+MM-ODN组比较,SNI组、SPRF组和PRF+AS-ODN组的脊髓背角内GRK2荧光检测和蛋白表达值均明显下降（P<0.05）。在SNI术后第42天,与PRF组和PRF+MM-ODN组比较,SNI组、SPRF组和PRF+AS-ODN组的大鼠海马内IL-1β表达明显升高（P<0.05）。各组大鼠在SNI术后第21天和42天的海马内IL-10荧光检测和蛋白表达差异无统计学意义（P>0.05）。【结论】脊髓背角内GRK2表达下降参与SNI大鼠神经病理性疼痛-抑郁共病发生。脉冲射频背根神经节可显著逆转SNI后脊髓背角内低表达的GRK2,部分抑制海马内IL-1β表达而减轻炎症反应,进而改善神经病理性疼痛-抑郁共病。
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