从噬菌体抗体库中筛选人绒毛膜促性腺激素的单链抗体

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通过抗原hCG的固相淘选,使展示抗原特异性单链抗体的重组噬菌体得到富集.用经过淘选的重组噬菌体颗粒感染大肠杆菌TG1,在辅助噬菌体M13K07作用下,获得重组噬菌体悬液.用分离单菌落,用ELISA方法进行测活,从中挑选出生物活性最高的重组噬菌体制成悬液,感染大肠杆菌HB2151,使单链抗体以分泌型表达.采用SDS-PAGE及凝胶扫描确定可溶性抗体的表达量.为了获得单链抗体的高效表达,分离单链抗体基因,并对表达载体选择pET-21a(+)进行了改造.将抗体基因插入分泌型表达载体,对重组载体进行诱导表达,并对产品进行了初步分析.结果显示,抗体基因能进行分泌表达,其表达量得到提高.
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