纤维软骨细胞-胶原复合物修复半月板损伤的实验研究

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目的:以胶原酶消化法分离提取狗半月板纤维软骨细胞、体外扩增培养,然后以胶原-GAG模板为载体,将经体外扩增的纤维软骨细胞回植入体内,探讨以此修复半月板损伤的可行性。方法:以胶原酶消化法将狗半月板纤维软骨细胞分离出来并加以纯化,在体外培养条件下研究其增殖及生长特性;采用Yannas法以Ⅰ型胶原和糖胺聚糖(GAG)作为原料制备Ⅰ型胶原-GAG模板,并检测其作为功能细胞载体的可能性;最后通过以胶原-GAG模板为载体,将经体外扩增培养的纤维软骨细胞植入半月板缺损区,探讨以此修复半月板损伤的可行性。结果:在体外培养条件下,狗半月板纤维软骨细胞的增殖分裂能力活跃,可以通过离体培养使其实现数目的扩增;大体标本、扫描电镜、裸鼠皮下标本组织切片观察表明,本实验制成的Ⅰ型胶原-GAG模板是一种海绵样结构,其表面及内部含有丰富、孔径大小适中的微孔结构,适合细胞在其中生长,自制胶原模板具有无毒、可生物降解的特性。术后3、6、12周大体、组织学观察显示胶原-GAG模板被逐渐吸收,而纤维软骨细胞逐渐合成分泌新生基质,经不断改建形成半月板样纤维软骨组织,实验组同时可见相对应的关节软骨面光滑,胶原对照组及空白对照组修复较差或未见修复,对应关节软骨面出现退变或磨损。结论:利用经体外扩增的纤维软骨细胞,经由胶原-GAG载体按一定的密度植入半月板缺损区,是一种较为 第二军医大学博土论文·中文摘要可行的修复半月板损伤进而防止发生骨性关节炎的方法。尚需要在生物材料学、生物力学、生物化学等方面进行更为深入的研究。
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