背景:Graves病（GD）是一种常见的自身抗体介导的器官特异性自身免疫性疾病。临床症状明显,疗程长,复发率高。促甲状腺激素受体抗体（TRAb）升高是导致GD临床症状和治疗棘手的关键原因。既往研究发现CD4+T淋巴细胞功能异常在GD自身抗体产生过程中起着桥梁作用。micro RNA（mi RNA）作为基因转录后调控的重要调节分子,参与多种自身免疫炎症反应过程,可调节T淋巴细胞分化及功能发挥。此外,自身抗体的产生常继发于炎症细胞浸润甲状腺局部,而趋化因子配体21（CCL21）是参与趋化T淋巴细胞、B淋巴细胞和DC细胞等炎症细胞浸润至外周组织的一种重要的趋化因子。目的:研究GD患者CD4+T淋巴细胞中mi RNAs表达谱及mi R-4443参与GD发生、发展的机制,并研究GD患者血浆和CD4+T淋巴细胞中CCL21水平及调控其表达的因素。方法:运用Microarray芯片方法检测未治疗的初诊GD患者（u GD）及正常志愿者（h CD）外周血CD4+T淋巴细胞中mi RNAs表达谱;根据芯片结果和既往文献报道,挑选8个mi RNAs进行realtime PCR扩大样本验证;将u GD患者的mi RNAs相对表达量与GD相关临床参数进行相关性分析,选择与GD最相关的mi R-4443进行深入研究;分选CD4+T淋巴细胞,转染mi R-4443 mimic或inhibitor后,观察mi R-4443对CD4+T淋巴细胞炎症因子、趋化因子和增殖的影响;通过报告基因,表达分析和小分子干扰RNA（si RNA）实验证实mi R-4443作用的靶基因和靶通路。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和realtime PCR分别检测血浆和外周血CD4+T淋巴细胞中CCL21的表达情况;分析CCL21与临床参数和骨桥蛋白（OPN）的相关性;体外培养外周血单个核细胞（PBMCs）,分成对照和不同浓度人重组OPN（r OPN）处理组,培养结束后立即分选纯化CD4+T淋巴细胞并收集细胞培养上清,检测CCL21表达情况。结果:u GD和h CD的mi RNA谱存在显著差异;扩大样本验证后发现mi R-4443与GD相关临床参数显著相关;mi R-4443在u GD患者中显著上调,随着治疗的进展逐渐恢复正常水平;mi R-4443可增加CD4+T淋巴细胞分泌包括IL-1β、IL-6、IL-17、IFNγ及CCL21在内的多种炎症和趋化相关细胞因子,可促进CD4+T淋巴细胞增殖;mi R-4443可直接与肿瘤坏死因子受体相关因子4（TRAF4）的3’UTR结合以抑制其表达,从而激活NF-κB通路;进一步分析发现u GD患者CD4+T淋巴细胞中TRAF4表达下降,且与mi R-4443水平显著负相关,当抑制其表达后有类似于过表达mi R-4443的作用。u GD患者血浆和CD4+T淋巴细胞中高表达CCL21,CCL21在GD缓解后才恢复正常水平;CCL21水平仅与TRAb正相关,与其他GD相关临床指标均无明显关系;血浆CCL21水平与血浆OPN水平存在相关性;进一步研究发现r OPN可促进CCL21的表达,且呈时间和剂量依赖。结论:GD患者CD4+T淋巴细胞中上调的mi R-4443通过抑制TRAF4的表达以促进NF-κB通路活性,从而影响CD4+T淋巴细胞的功能,参与GD发生、发展的免疫致病过程。CCL21水平与GD发生、发展密切相关,可能成为监测GD病情及复发的新的分子标志物。