植物根际促生菌的筛选及其应用

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重金属污染越来越受到人们的关注,微生物强化植物修复由于其过程迅速,费用低,又兼具美化环境的功能,吸引了许多科学研究者的兴趣。另外,关于修复植物材料的后处理的利用,也成为近年的热点问题。本研究从尾矿地区生长的植物根际筛选到具有一定促生能力的三株细菌,菌株Y4-4、WTC34和WK61。在以葡萄糖和硫酸铵为碳、氮源的NB砒P液体培养基中培养,三菌株均具有较好的解无机磷能力。通过测试还发现三菌株具有产生长素、铁载体及氢氰酸的能力。通过研究生理生化指标、PCR扩增和16S rDNA测序结合同源性分析,并对三菌株的生物学特性进行了系统考察。研究结果表明:菌株Y4-4、WTC34和WK61分别初步鉴定为成团泛菌属(Pantoea sp.)、假单胞菌(Pseudomonas sp.)和西地细菌属(Cedeceasp.)。三菌株均对氯霉素、氨苄青霉素、红霉素、链霉素有一定抗性。Y4-4最适宜生长温度在25℃左右,WTC34在20-30℃之间均生长良好,WK61的最适温度为30℃左右;Y4-4在pH4-10之间均能生长,WTC34在pH6-9之间生长良好,WK61的最适pH为8左右;三菌株均具有较强的产酸能力。通过室内盆栽试验,研究三菌株及加菌次数对生长于汤山Cu污染土壤和栖霞山Pb、Zn污染土壤中苜蓿的影响。土培结果显示:菌株Y4-4能够在Cu污染土壤中存活,多次接种菌株Y4-4显著提高植株地上部干重及总干重,分别提高22.6%和21%,并且显著提高苜蓿根系中的P含量(19%)。接种菌株Y4-4、WTC34和WK61对苜蓿地上部Cu积累总量的最大提高幅度可以分别提高15%、22%、18%。与对照相比,单次或多次接种菌株Y4-4均能促进种植于栖霞山Pb、Zn污染土壤中的紫花苜蓿的生长,多次接种菌株Y4-4提高植株的地上部干重(23.4%)和总干重(22%)。接种Y4-4可以提高紫花苜蓿对Zn的吸收,其中多次接种菌株Y4-4显著提高了植株地上部Zn含量,提高幅度达33%,植株总Zn积累量增加了30.3%。在提高土壤重金属植物修复的研究中具有较高的应用潜力。通过室内小麦盆栽试验,研究植物残体与菌株Y4-4相结合对盐碱土中小麦生长的影响。结果表明:添加油菜湿样显著增加了植物地上部(150.6%)和地下部(112.7%)生物量。与对照相比,虽然单独加菌(地上部增加16.2%,地下部增加6.14%)和单独加油菜干样(地上部增加26.2%,地下部增加24.8%)差异不显著,但是两者共同作用下(地上部增加70%,地下部增加56.4%)能显著增加植株地上部和地下部的生物量。与对照相比,添加油菜残体干样能显著促进植物地上部和地下部Cu含量,说明植物残体与促生细菌结合具有开发为有机铜肥的潜力。为了进一步研究菌株Y4-4在重金属污染土壤和盐碱土中的生长情况,在离心管中加入少量土,接种菌株Y4-4培养15天,不同时间取样测定土壤pH值、速效磷含量、速效钾含量和细菌数量。结果显示:接种菌株Y4-4后,土壤有效磷含量先升高后降低,并且与土壤pH值呈负相关。土壤细菌含量先升高后降低,说明菌株Y4-4可以在重金属污染和盐碱土壤中生存。接种Y4-4对汤山土中有效态Cu含量、栖霞山土中有效态Zn含量的增加也具有一定的作用。
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