目的：　　近视是全球发病率最高的一类屈光不正，且逐年呈上升趋势，严重威胁着人类的视觉健康，但其具体的发病机制至今未明。多巴胺（Dopamine, DA）作为视网膜上一种重要的神经递质和调质，在近视中的作用重要而复杂。多巴胺需要结合受体发挥作用，本实验室前期结果显示：D2 类受体激动剂可以促进豚鼠形觉剥夺性近视；反之，D2类受体拮抗剂抑制形觉剥夺性近视。D2类受体包括D2、D3、D4受体，其中D4受体是视网膜上一类高含量受体。它是否也参与近视形成以及在近视形成过程中会发挥怎样的作用。本实验利用正常屈光发育豚鼠和形觉剥夺（Form deprivation, FD）豚鼠模型，通过球旁注射D4受体激动剂或拮抗剂,干预视网膜内D4受体水平，探究多巴胺D4受体参与近视形成的可能机制。　　方法：　　实验开始筛选屈光度在3-8 Diopter（D），双眼屈光参差<2D的3周龄三色豚鼠204只，雌雄不限。将三色豚鼠分成两大组：正常屈光发育组和形觉剥夺组。每组豚鼠每日右眼注射溶剂或药物，连续注射4week(w)。本实验中使用两种药物，分别是多巴胺D4受体激动剂PD168077和D4受体拮抗剂L745870。两种药物的剂量分别为：PD168077低剂量（2μg/100μl），高剂量（20μg/100μl）；同样拮抗剂L745870低剂量（2μg/100μl），高剂量（20μg/100μl）。实验流程：首先，分别在实验前 0w和实验后 2w、4w 检测屈光度和眼轴长度等生物学参数；其次，实验 2w（豚鼠 5周龄）时采用视网膜电图检测视网膜功能；最后在实验 4w（豚鼠 7 周龄）对豚鼠进行处死取材，然后利用免疫荧光（Immunofluorescence, IF）或蛋白免疫印迹(Western-blot, WB)检测多巴胺下游信号蛋白的变化。　　结果：　　1. 正常屈光发育豚鼠组,球旁注射D4受体药物4w后，用IF和WB方法检测多巴胺下游靶蛋白（p-CREB、CREB）的表达情况，发现无论是激动剂或是拮抗剂高浓度组对比溶剂组p-CREB表达无统计学差异。同理用WB方法检测下游靶蛋白（p-ERK）发现激动剂PD168077高浓度药物组注射眼对比对侧眼有增加（t=2.417， p=0.027，配对t检验），药物注射眼对比溶剂注射眼也有增加（t=-2.202，p=0.043，独立样本t检验）；反之拮抗剂L745870高浓度药物注射眼对比对侧眼有降低（t=4.712，p＜0.001，配对t检验），药物注射眼对比溶剂注射眼也有降低（t=2.173， p=0.045，独立样本t检验）。　　正常屈光发育豚鼠组,球旁注射D4受体激动剂PD168077 2w后，ERG高浓度组对比溶剂组，在明适应条件下，a、b波振幅均升高,且有统计学差异（a波：F=17.336， p=0.001，重复检测方差分析；b波：F=6.028，p=0.030，重复检测方差分析）。同理，球旁注射D4受体拮抗剂L745870 2w后，ERG高浓度组对比溶剂组，明适应时，a、b波振幅有降低的趋势。　　2. 正常屈光发育豚鼠组，球旁注射D4受体激动剂PD168077分别在实验前0w （屈光度：溶剂组vs.低剂量组vs.高剂量组:0.48±1.18Dvs.0.50±1.08D vs.0.52 ±0.64D）、实验2w（屈光度：溶剂组vs.低剂量vs.高剂量: 0.34±1.32D vs.0.47 ± 1.52D vs. 0.50 ± 0.77D ）、实验 4w （屈光度: 溶剂组 vs. 低剂量 vs. 高剂量:0.00±1.04D vs.-0.16±1.28 vs. 0.11±0.78D）均进行屈光度检测，发现各组间无统计学差异（F=0.043，p=0.958，重复检测方差分析）。相应的玻璃体腔深度和眼轴长度各组间也没有明显变化（玻璃体腔深度：F=2.691，p=0.082，重复检测方差分析；眼轴长度：F=0.781，p=0.466，重复检测方差分析）。　　同样，对正常屈光发育豚鼠组，球旁注射D4受体拮抗剂L745870，在实验前0w、实验2w、实验4w三个时间点检测屈光度，发现无统计学差异（F=0.941，p=4.000，重复检测方差分析）。同时玻璃体腔深度和眼轴长度亦无明显变化，其中玻璃体腔深度：（F=0.925，p=0.406，重复检测方差分析）；眼轴长度：（F=0.363，p=0.698，重复检测方差分析）。　　3.在形觉剥夺豚鼠组，球旁注射激动剂PD168077 2w后，高浓度组对比溶剂组，暗适应下，b波振幅增加，且有统计学差异（F=4.613,p=0.047，重复检测方差分析）；明适应时，a波振幅有增加趋势，b波变化不明显；同样注射拮抗剂L745870 2w后，高浓度组对比溶剂组，明适应下，a、b波振幅有降低趋势，但无统计学差异。　　4. 形觉剥夺豚鼠组，球旁注射激动剂PD168077在实验前0w（屈光度：溶剂组vs.低剂量组vs.高剂量组: 0.48±1.18Dvs.0.39±0.87Dvs.0.55±1.00D）、实验2w（屈光度：溶剂组vs.低剂量组vs.高剂量组:-3.34±2.33D vs.-3.10±2.24Dvs.-3.12±1.91D）、实验4w（屈光度:溶剂组vs.低剂量组vs.高剂量:-5.15±2.13D vs.-5.64±2.02 vs.-4.97±2.31D）进行屈光度的检测，发现各组之间无统计学差异（F=0.090， p=0.914，重复检测方差分析）。相应的玻璃体腔深度和眼轴长度各组间也无明显变化（玻璃体腔深度：F=0.454，p=0.638，重复检测方差分析；眼轴长度：F=1.036， p=0.363，重复检测方差分析）。　　同理，形觉剥夺豚鼠组，球旁注射D4受体拮抗剂L745870后，在实验前0w、实验2w、实验4w三个时间点检测屈光度，发现高浓度药物有抑制近视作用（F=4.158， p=0.022，重复检测方差分析）。但是玻璃体腔深度和眼轴长度在各时间点进行统计学分析，变化不明显。其中玻璃体腔深度：（F=0.414，p=0.663，重复检测方差分析）；眼轴长度：（F=0.719，p=0.698，重复检测方差分析）。　　结论：　　1. 球旁注射 D4 受体激动剂或拮抗剂 4 周后，多巴胺下游靶蛋白（p-CREB、CREB）无明显变化；此外激动剂PD168077对靶蛋白p-ERK有增加作用，拮抗剂L745870对其有降低作用。明适应下，D4受体激动剂能增加a、b波振幅；同理，拮抗剂对a、b波振幅有降低趋势。　　2. D4受体激动剂或拮抗剂作用于豚鼠视网膜后，基本不影响正常及形觉剥夺豚鼠屈光状态及眼球生长，提示D4受体可能不参与豚鼠屈光发育和近视形成。