核桃楸外果皮活性成分的提取分离与应用

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核桃楸是我国十分重要的药源植物,其树皮、树叶及果实、外果皮均可入药,有显著的抗氧化、消炎、抗癌以及抑菌等作用。本文研究了核桃楸外果皮活性成分的提取分离、三萜类物质提取工艺的优化以及其生物活性的研究应用,为开发核桃楸更多的综合利用价值提供理论依据。采用体积分数80%的乙醇溶液对核桃楸外果皮浸提,并依次使用石油醚、氯仿和乙酸乙酯进行萃取。各萃取相经过薄层色谱和柱层析色谱分离后,利用气相色谱(GC)和气相色谱-质谱(GC-MS)检测各相中活性成分。石油醚萃取相洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯=20:80分离出6种活性成分,氯仿萃取相洗脱剂为氯仿:乙酸乙酯=40:60分离出7种活性成分,氯仿萃取相洗脱剂为氯仿:乙酸乙酯=20:80分离出6种活性成分,乙酸乙酯萃取相洗脱剂为氯仿:甲醇=80:20分离出4种活性成分。在单因素实验的基础上,根据Box-Behnken中心组合法设计多因素试验,利用响应面法优化提取工艺条件,探究出乙醇体积分数、超声温度、超声时间和液料比对核桃楸外果皮总三萜提取率的影响,确定最佳提取工艺条件,以同样方法提取核桃楸叶总三萜作为对比。核桃楸外果皮中总三萜最佳提取条件为:乙醇体积分数80%,超声温度44℃、超声时间46 min、液料比20:1,此时外果皮总三萜类的最大提取率为2.70 mg/g。核桃楸叶中总三萜的最佳提取条件为:乙醇体积分数80%、超声温度50℃、超声时间34 min、液料比16:1,此时叶中总三萜类的最大提取率为1.53 mg/g。核桃楸外果皮提取总三萜的应用主要体现在抗氧化活性和抑菌活性两方面。通过核桃楸外果皮三萜类物质对4种自由基的消除作用,其对羟基自由基、亚硝酸根离子、超氧阴离子和DPPH自由基的清除率分别为:46.72%、58.31%、62.82%、71.74%,确定其对4种自由基的抗氧化活性排序为:DPPH自由基>超氧阴离子>亚硝酸根离子>羟基自由基。通过核桃楸外果皮三萜类物质对黄孢原毛平革菌(白腐真菌)和绿色木霉菌的抑制作用,确定其对白腐真菌的最低抑菌浓度在11-22 μg·mL-1范围内,对绿色木霉菌的最低抑菌浓度在5.5~11 μg·mL-1范围内,其对绿色木霉菌的抑菌活性强于对白腐真菌的抑菌活性。
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