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目的:探讨粟米草甾体皂甙(Mollugo pentaphylla)对SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞(Rat Aortic Smooth Muscle Ce11s,RASMC)增殖、迁移以及胶原蛋白合成的影响。方法:采用组织块贴壁培养法原代培养SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞,选用第5代VSMC作为实验对象。实验按以下分组:①空白对照组(含10% FBS培养液);②溶剂对照组(含1%DMSO+10% FBS培养液);③不同浓度的粟米草甾体皂甙组(1、3、9、27μmol/L粟米草甾体皂甙孵育60min后加入10%FBS)。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察不同浓度的粟米草甾体皂甙对VSMC增殖,选用细胞刮片法观察不同浓度的粟米草甾体皂甙对VSMC迁移的影响,选用比色法观察不同浓度的粟米草甾体皂甙对VSMC的羟脯氨酸含量的影响。结果:(1)VSMC的鉴定:通过倒置相差显微镜观察细胞呈梭形或长梭形,细胞经抗α-actin抗体检测后,光镜下可见细胞胞浆内出现黄褐色颗粒,呈阳性,而对照组呈阴性,细胞胞浆内未见黄褐色颗粒。光镜和免疫细胞化学法鉴定,均证实成功培养出大鼠VSMC,且纯度较高。(2)MTT法检测不同浓度粟米草甾体皂甙药物组对VSMC增殖的影响:与溶剂对照组和空白对照组相比,1μmol/L粟米草甾体皂甙药物组的VSMC吸光度OD值虽有增加,在72h时,与空白对照组相比抑制率为22.7%,但无统计学差异(P﹥0.05);与空白对照组相比,浓度分别为3、9、27μmol/L粟米草甾体皂甙药物组的吸光值度OD值均较低,在72h时,VSMC增殖抑制最明显,其增殖的抑制率分别为42.8%(P<0.01)、62.4%(P<0.01)、69.7%(P<0.01)。MTT法结果显示,粟米草甾体皂甙能抑制VSMC的增殖,具有浓度依赖性。(3)细胞刮片法检测不同浓度粟米草甾体皂甙药物组对VSMC迁移的影响:细胞刮片法显示空白对照组VSMC迁移距离明显增加,与溶剂对照组相比无显著性差异(P﹥0.05);1、3、9、27μmol/L粟米草甾体皂甙药物组与空白对照组相比VSMC迁移距离减少,有显著性差异(P﹥0.05),细胞迁移抑制率分别为4.4%(P<0.05～0.01)、12.4%(P <0.01)、20.5%(P<0.01)和33.7%(P<0.01)。细胞刮片法结果表明:粟米草甾体皂甙能明显抑制VSMC迁移,具有浓度依赖性。(4)比色法检测不同浓度粟米草甾体皂甙药物组对VSMC羟脯氨酸合成的影响:与空白对照组和溶剂对照组相比,粟米草甾体皂甙低浓度药物组(1μmol/L)上清液羟脯氨酸含量无显著变化,无统计学差异(P﹥0.05);但浓度分别为3、9、27μmol/L粟米草甾体皂甙药物组的上清液羟脯氨酸含量低于空白对照组,有统计学差异(P <0.05),提示粟米草甾体皂甙对VSMC上清液羟脯氨酸含量有明显的抑制作用,具有浓度依赖性。结论:粟米草甾体皂甙能够抑制VSMC增殖、迁移以及胶原蛋白合成。本实验为粟米草甾体皂甙治疗血管增生性疾病提供实验依据。