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目的:观察补肾养阴方药左归丸联合促性腺激素释放激素拮抗剂西曲瑞克对平衡卵巢局部的氧化应激反应的作用,研究该中西结合的方法对改善环磷酰胺所致的卵巢储备下降的机制。方法:雌性ICR小鼠共分为空白组（A组）、模型组（B组）、西曲瑞克组（C组）,左归丸组（D组）、中西结合组（E组）,从实验第一天开始称为d1,实验最后一天是d38。d1-d5予C组和E组腹腔注射西曲瑞克混悬液,其余三组予腹腔注射生理盐水;d6-d10予B、C、D、E组环磷酰胺腹腔注射,A组予生理盐水腹腔注射;d11-d38予D组和E组左归丸颗粒剂混悬液灌胃,其余三组纯水灌胃。ELISA法检测卵巢匀浆中FSHR、LH、AMH、GDF-9、BDNF、LIF、NO、NOS、ROS、ATP水平,检测外周血中FSH、E2水平,免疫组化法检测p53、p21、SIRT1蛋白在卵巢中的表达。结果:1.体重:空白组体重在实验周期38天内平稳增长,其余组别在d6后持续快速下降,动物出现脱毛、萎靡不振、大便稀薄等现象;从d11开始,西曲瑞克组、左归丸组、中西结合组体重开始回升,到d38左归丸组几乎恢复到与空白组相同的体重水平,西曲瑞克组与中西结合组的体重也得到一定恢复;模型组的体重一直在快速下降。2.动情期及动情间期:与空白组对比,模型组的动情期天数明显减少（P<0.01）;动情间期比空白组长（P<0.01）。左归丸组和中西结合组的动情期均恢复到与空白组相当的水平,跟模型组相比有统计学意义;相对地,两组的动情间期跟模型组相比有统计学意义（P<0.01）。周期长度:与空白组对比,模型组的动情周期长度明显延长（P<0.01）,中西结合组的周期长度与空白组的周期长度相近,跟模型组相比有统计学意义（P<0.01）。3.卵巢切片HE染色结果显示:原始卵泡:与空白组对比,模型组的原始卵泡数明显减少（P<0.01）。与模型组对比,三个治疗组的原始卵泡数较高,差异均有统计学意义（P<0.01）。生长卵泡:对比空白组,模型组的生长卵泡数减少（P<0.05）。中西结合组的生长卵泡数接近空白组水平,与模型组相比,差异有统计学意义（P<0.05）。闭锁卵泡:与空白组对比,模型组的闭锁卵泡数明显增多趋势,但差异未达到统计学意义（P>0.05）;三个治疗组的闭锁卵泡与模型组相比有下降,但差异未达到统计学意义（P>0.05）。4.免疫组化结果显示:SIRT1:与空白组对比,模型组SIRT1蛋白表达明显减少。与模型组对比,三个治疗组的SIRT1蛋白表达增加,其中左归丸组和中西结合组较为明显。P53:与空白组对比,模型组P53蛋白表达明显增多。与模型组对比,西曲瑞克组和左归丸组P53蛋白表达减少,中西结合组的P53蛋白表达则明显减少,接近空白组水平。P21:与空白组对比,模型组P21蛋白表达明显增多。与模型组对比,西曲瑞克组和左归丸组P21蛋白表达减少,中西结合组的P21蛋白表达明显减少,接近空白组水平。5.ELISA法检测各组血清及卵巢局部激素及AMH水平显示:血清FSH:模型组的血清FSH水平比空白组显著上升,组间差异有统计学意义（P<0.05）。西曲瑞克组、左归丸组、中西结合组的血清FSH水平下降,其中左归丸组及中西结合组降低较显著,与模型组相比有显著统计学差异（P<0.01）;血清E2:模型组与空白组对比血清E2浓度下降,但差异未达到统计学意义（P>0.05）,三个治疗组的E2浓度比模型组显著上升（P<0.01）。卵巢LH:与空白组对比,模型组卵巢局部的LH浓度上升（P<0.01）,三个治疗组的LH水平下降（P<0.01）。卵巢E2:与空白组对比,模型组卵巢局部的E2浓度下降（P<0.01）;左归丸组及中西结合组E2浓度上升,但与模型组相比差异没有达到统计学意义（P>0.05）。西曲瑞克组E2浓度大幅度下降（P<0.01）。卵巢AMH:与空白组对比,模型组卵巢局部的AMH浓度下降（P<0.01）,经治疗后左归丸组及中西结合组的AMH浓度恢复到空白组水平,其中中西结合组与模型组相比差异显著（P<0.01）。卵巢FSHR:与空白组对比,模型组卵巢局部FSHR浓度下降（P<0.05）,经治疗后三个治疗组的FSHR浓度上升,其中中西结合组与模型组对比差异最明显（P<0.01）。6.ELISA法检测各组氧化应激相关因子显示:与空白组对比,模型组NOS浓度上升（P<0.05）,经治疗后左归丸组、中西结合组较模型组下降,差异有统计学意义（P<0.05）。与空白组对比,模型组NO浓度上升（P<0.01）,三个治疗组的NO浓度较模型组下降,差异有统计学意义（P<0.01）。与空白组对比,模型组ROS浓度显著上升（P<0.01）,三个治疗组的ROS浓度均有下降,其中中西结合组的浓度与空白组相仿,与模型组相比差异显著（P<0.01）。与空白组对比,模型组ATP浓度显著下降（P<0.05）,三个治疗组的ATP浓度均有上升,其中中西结合组的浓度与空白组相仿,左归丸组与模型组相比差异显著（P<0.01）7.ELISA法检测各组生长发育相关因子显示:与空白组对比,模型组DBNF、GDF-9浓度均显著下降（P<0.01）,经治疗后三个治疗组BDNF的浓度上升,其中中西结合组恢复到空白组水平,与模型组相比,差异有统计学意义（P<0.01）。另外,三个治疗组的GDF-9浓度均提高到空白组水平,差异有统计学意义（P<0.01）。与空白组对比,模型组LIF水平降低,经治疗后三个治疗组的LIF浓度上升,但差异均未达到统计学意义。结论:1、化疗药物环磷酰胺的使用可以诱导卵巢局部发生氧化应激反应,使卵巢功能受损从而造成卵巢储备下降;本动物实验中使用CTX 50mg/kg,连续使用5d,满足血清激素FSH上升,卵巢内E2降低的诊断标准。2、SIRT1/P53/P21通路参与CTX诱导的DOR的发生,其机制可能与抑制卵巢局部氧化应激反应有关。3、促性腺激素释放激素拮抗剂西曲瑞克联合补肾养阴方药左归丸可通过调节SIRT1/P53/P21通路改善卵泡微环境卵巢内的氧化应激反应,减少过氧化产物的产生,在一定程度上修复CTX所致的DOR,其疗效优于单用Cetrorelix或左归丸。但其确切机制尚待进一步研究。