变异冬红果光合生理特性与组培技术的研究

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冬红果(Malus spectabilis)是蔷薇科苹果属落叶灌木或小乔木,因该变异株不仅叶片由紫变绿,而且果实初期亦呈紫色,至深秋果色由紫入红,寓意万紫千红,相较于正常冬红果,它既增添了色彩变化的多样性,满足了人们对观赏植物新、特、奇的要求,而叶片脱落较早,又在一定程度上使得观果期向前延伸。因此,具有这一特异性状的冬红果变异植株未来将更受市场欢迎。对于变异植株优良性状需要通过组织培养进行保存,但有些植物的变异植株长势较弱,并体现在光合作用上,所以对于变异冬红果,可以通过测量它的光合作用,进而推定变异冬红果组培苗能否正常生长,如果变异植株的光合能力不低于正常植株,进而采用组培的方式进行变异冬红果的扩繁,如果变异冬红果的光合能力弱于正常冬红果,即组织培养无意义。因此,论文首先测量比较变异植株与正常冬红果的光合速率,接着进行组织培养的研究。本研究通过研究变异冬红果光合生理特性与组织培养技术,得出以下结论:(1)通过光合气体交换参数特性研究,发现4月份正常与变异冬红果净光合速率日变化均呈双峰曲线,12:00左右出现峰值,16:00左右出现次峰,并出现由非气孔限制因素引起的“光合午休”现象;变异冬红果的Pn值在每个点均比正常冬红果大,说明其光能利用率比正常冬红果高。(2)通过叶绿素荧光特性研究,发现变异冬红果与正常冬红果在不同季节的荧光参数值不同,主要体现在春季和夏季变异冬红果的F_v/F_m、ΦPSII、qP、E TR等值均比正常冬红果大;秋季变异冬红果ΦPSII、qP、ETR、F_v/F_m的值均低于正常冬红果。因此,通过两种冬红果光合与荧光参数的差异分析,可知,变异冬红果在春夏季两个主要生长期光合能力均优于正常冬红果,而秋季略差,由此可知,变异冬红果组培苗后期可正常生长,且通过观察发现,该变异株叶片脱落较早,由此可知,变异冬红果成熟期较早,提前落叶,而这一特性,延长了观果期,更具有观赏价值,因此,可以通过组织培养的研究保持其特异性状。(3)通过外植体的筛选与消毒研究,发现带芽茎段最佳的消毒方式为0.05%氯化汞20min;变异冬红果叶柄形成的愈伤组织分化较为困难,叶片的分化率也不高,因此选用茎段作为外植体,进行芽诱导培养,该种方法为变异冬红果组织培养较为理想的培育方式。(4)通过不定芽诱导启动培养研究,发现以经过最佳消毒方式消毒后未污染且成活的变异冬红果单芽茎段为试材,采用三因素三水平的正交试验设计,以培养基、6-BA、NAA为试验的三因素,30d后统计不同处理的启动率,变异冬红果茎段不定芽诱导启动的最佳培养基及激素组合,即MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L。(5)通过芽继代增殖培养研究,发现将诱导出的不定芽切下作为继代培养的材料,并采用二因素三水平的正交试验设计,以MS作为基本培养基,6-BA和IBA为试验因素,30d后观察芽的长势,记录其增殖系数,并进行极差分析和方差分析,进而筛选出变异冬红果芽继代增殖的最佳激素组合,变异冬红果芽继代增殖的最优水平组合为MS+6-BA 2.5 mg/L+IBA 0.3mg/L。(6)通过组培苗诱导生根培养研究,发现以1/2MS为基本培养基,并添加IBA和NAA作为生根培养基,通过平均生根数和根形态特征情况分析,0.5mg/L IBA平均生根数较高且生根情况最好。因此,最佳的生根培养基为1/2MS+0.5mg/L IBA。(7)通过组培苗的炼苗与移栽研究,发现移栽基质不同对移栽成活率有较大的影响。以3/5菜园土+2/5蛭石为基质,组培苗成活率最高,可达到86.67%,移栽苗生长健壮。因此,3/5菜园土+2/5蛭石是变异冬红果组培苗最为合适的移栽基质。
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