目的:选120只昆明小鼠(仔鼠)用递增剂量在第1~5 d、6~10 d和11~15 d分别腹腔连续注射海洛因溶液同时给仔鼠灌胃杜仲水提液进行保护,检测仔鼠体重、肝重、血浆生化指标、肝组织TrxR和MPO活性、肝组织MDA含量、肝组织结构及Caspase-3和Survivin蛋白表达的变化,探讨杜仲水提液对海洛因成瘾仔鼠肝损伤的保护作用。方法:选出生1周龄的昆明小鼠120只,随机分为4个处理组,即对照组、海洛因组、杜仲1组和杜仲2组,每组30只。海洛因组、杜仲1组和2组分别用递增剂量连续腹腔注射海洛因溶液15 d,每天早晚两次(8:00 am,16:00 pm),其中在第1~5 d、6~10 d、11~15 d分别注射(0.2 mL)2 g/L、3 g/L、4 g/L的海洛因溶液,同时给对照组注射0.2 mL生理盐水。每次注射完海洛因溶液1 h后,杜仲1、2组分别灌胃0.6 g/mL、1.8 g/mL的杜仲水提液,同时给对照组和海洛因组灌胃等量生理盐水。在第5、10和15天每组各随机处死10只仔鼠,称量并检测仔鼠体重和肝重的变化,用比色法检测仔鼠血浆中γ-GT、AKP、ALT、AST活性及仔鼠肝组织中TrxR、MPO活性和MDA含量的变化,将肝组织切片置于光学显微镜下观察仔鼠肝组织结构的变化,用SABC-免疫组化法检测仔鼠肝组织中Caspase-3和Survivin蛋白表达的变化。结果:1、仔鼠体重、肝重的变化:与对照组相比,各时期海洛因组仔鼠注射海洛因后,仔鼠的体重和肝重有不同程度的降低;给仔鼠灌胃杜仲水提液进行保护后,与海洛因组相比,杜仲1、2组体重和肝重又有不同程度的升高,但低于对照组。2、仔鼠血浆γ-GT、AKP、ALT、AST活性的变化:与对照组相比,随着注射海洛因时间的增长,各时期海洛因组仔鼠血浆γ-GT、AKP、ALT、AST活性均有明显的升高。但与海洛因组相比,杜仲1、2组仔鼠血浆γ-GT、AKP、ALT、AST活性均有不同程度的降低,但高于对照组。3、仔鼠肝组织中TrxR、MPO活性和MDA含量的变化:对照组相比,各时期海洛因组仔鼠肝组织TrxR活性明显降低,并随着注射海洛因时间的增长活性降低越明显;MPO活性明显升高,并随着注射海洛因时间的增长活性升高越明显。但与海洛因组相比,杜仲1、2组仔鼠肝组织TrxR活性均有不同程度的升高,MPO活性均有不同程度的降低。各时期海洛因组仔鼠肝组织MDA含量与对照组相比均有升高,并随着注射海洛因时间的增长,升高越明显,但与海洛因组相比,杜仲1、2组仔鼠肝组织MDA含量均有所降低。4、仔鼠肝组织结构的变化:对照组仔鼠肝组织结构完整,染色均匀,细胞索规则、肝血窦正常,肝小叶结构完整,肝细胞形态清晰可见。与对照组相比,海洛因组仔鼠肝组织出现了明显损伤,肝血窦明显增大,部分内皮细胞脱落,肝细胞出现明显肿胀、细胞核明显固缩、肝细胞疏松出现大小不一的空泡、变性、坏死等病理化现象。在杜仲1组和2组中,仔鼠肝组织损伤明显减轻,肝细胞排列基本整齐,肝血窦明显缩小,肝细胞核固缩和肝细胞空泡化现象减少。5、仔鼠肝组织Caspase-3和Survivin蛋白表达的变化:SABC-免疫组织化学结果显示,各时期对照组仔鼠肝组织中Caspase-3和Survivin阳性表达量极低,染色的肝细胞数目非常少,染色较浅;各时期海洛因组肝组织Caspase-3和Survivin蛋白的表达量显著高于对照组,并且随着注射海洛因时间的增长仔鼠肝脏染色细胞数目增多,染色较深呈深棕色;杜仲1组和2组仔鼠肝组织中Caspase-3、Survivin的表达量均低于海洛因组,仔鼠肝脏染色细胞数量明显减少。结论:1、杜仲水提液影响海洛因肝损伤仔鼠的体重和肝重。海洛因进入机体通过血脑屏障与阿片受体结合刺激仔鼠的中枢神经,使仔鼠神经兴奋、出现竖尾跑圈现象,活动量增加、体能消耗增大,并且海洛因也可直接损害仔鼠胃肠道,使摄食减少进而使仔鼠的体重减轻,另外在肝脏代谢海洛因时,对肝脏造成了严重损伤,影响了仔鼠肝脏正常代谢活动,从而导致仔鼠的体重与肝重下降。但杜仲水提液能够补充仔鼠的能量消耗,减轻海洛因对肝脏的损伤从而使仔鼠的体重、肝重增加。2、杜仲水提液影响海洛因肝损伤仔鼠血浆γ-GT、AKP、ALT、AST活性。海洛因在代谢过程中,使肝脏积累了大量的活性氧自由基,影响了细胞抗氧化酶活性,增强肝细胞脂质过氧化反应,导致肝血液循环遭到破坏,肝细胞膜通透性明显增加,使γ-GT、AKP、ALT、AST释放到血液中,导致血浆γ-GT、AKP、ALT、AST活性均有所升高。但杜仲水提液能够有效抑制细胞脂质过氧化反应,维持细胞膜的完整性,从而降低仔鼠血浆γ-GT、AKP、ALT、AST活性。3、杜仲水提液影响海洛因肝损伤仔鼠肝组织TrxR、MPO活性和MDA含量。仔鼠腹腔注射海洛因后,破坏抗氧化系统,减弱其清除自由基的能力,使得仔鼠肝组织中TrxR活性减低,MPO活性明显升高,而MDA含量升高。杜仲水提液能很好的清除氧自由基,提高机体的抗氧化能力,有效减轻肝细胞的损伤,从而使TrxR活性升高,MPO活性明显降低,而MDA含量降低。4、杜仲水提液影响海洛因肝损伤仔鼠肝组织结构。仔鼠在注射海洛因后,海洛因入血分解为吗啡,吗啡进入肝脏后在肝脏中代谢积累使肝组织结构有不同程度的损伤,随着时间增长损伤越严重,而杜仲水提液能够抑制肝细胞的凋亡,减轻肝细胞损伤。5、杜仲水提液影响海洛因肝损伤仔鼠肝组织Caspase-3和Survivin蛋白的表达。海洛因组肝组织中Caspase-3和Survivin蛋白的表达显著高于对照组,表明海洛因能够增加仔鼠肝脏细胞凋亡。而杜仲水提液抑制肝组织Caspase-3、Survivin蛋白的表达,说明杜仲水提液通过Caspase-3介导的凋亡通路抑制肝细胞凋亡,既而保护肝脏。