猪干扰素α和γ在家蚕中的共表达及抗病毒活性测定

被引量 : 0次 | 上传用户:phoebus
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
近年来,随着规模化的生猪养殖厂越来越多,生猪发生重大疫病的风险在不断加大,猪瘟、高致病性猪繁殖与呼吸综合征、口蹄疫等重大疫病时有发生。猪的各类传染病,特别是病毒性传染病严重危害着养猪业的健康、可持续发展,常常造成重大经济损失,部分人畜共患病毒性传染病还直接危害到人类的健康。因此病毒病的预防和治疗显得尤为重要,研制出高效经济的抗病毒和免疫增强药物是非常重要的应对举措。干扰素是人和动物细胞受到特定干扰素诱生剂刺激后,产生的一种具有多种生物学活性的细胞因子。干扰素具有抗病毒、抗肿瘤和免疫增强等多种生物活性,是一种可治可防的抗病毒生物制剂。Ⅰ型干扰素和Ⅱ型干扰素联合使用具有协同作用,比单独使用其中一种具有更强的抗病毒效果。因此利用基因工程技术制备出含有猪干扰素α和猪干扰素γ的复合型干扰素对防治猪的病毒性疾病具有重要意义。本研究以家蚕杆状病毒为表达载体,在家蚕幼虫内成功地共表达了有活性的猪干扰素α和γ。首先优化并合成了猪干扰素α和γ基因,构建了含有猪干扰素α和γ基因的转移载体pVL-α-IRES-γ,与线性化的Bm-BacPAK6DNA用脂质体包埋共转染Bm-N细胞,进行细胞内同源重组,收集共转染上清液,并进一步筛选纯化病毒,将重组病毒感染五龄起蚕,濒死前收集蚕血,用Western-blot和微量细胞病变抑制法检测干扰素的表达及活性。Western-blot的结果表明猪干扰素α和γ均在家蚕中表达。在Vero/VSV*GFP系统上进行抗病毒活性测定,结果表明猪干扰素α和γ共表达产物有较为显著的抗病毒活性,效价能达2106U/mL以上。本研究结果为将来进一步进行含有猪干扰素α和猪干扰素γ的复合型干扰素的规模化生产和开发创造了条件。
其他文献
研究背景:创伤愈合是一个复杂的生物学过程,包括凝血、炎症,组织的增生,组织改建与重塑三个阶段[1];而细胞因子在愈合的整个过程中均发挥着重要的作用,急性创伤时,细胞因子能够发挥
随着现代科技的进步和生产的发展,SD(Secure Digital MemoryCard)、CF(Compact Flash)卡的应用越来越广泛,SD、CF卡的性能好坏直接关系到生活和生产上正在进行的工作的安全性和可靠
目的:通过比较高血压、糖尿病、高血压合并糖尿病患者与健康对照组尿微量白蛋白/尿肌酐(urinarymicroalbumin/creatinine ratio,UACR)的差异,探讨分析UACR对高血压、糖尿病及高血
一些报纸对于“练内功”重视度不够高,特别是流程意识淡薄,流程管理较为混乱,这在一定程度上压抑了新闻生产力的释放,影响了报业战略的实施及内在驱动力的提升,对品牌产生了
第一部分Treg/Th17平衡失调与肝移植急性排斥反应发生发展的关系研究目的:通过检测肝移植术后急性排异患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞和Th17细胞频率,探讨Treg/Th17比
外国文学作品进入高中语文教材经历了从无到有的过程,如今已经在高中语文教材中存在了近一个世纪。外国文学作品的选文质量直接影响着整个语文教学活动的质量,外国文学作品的教
逆向工程在产品数字化仿制、设计创新与改进等方面起着越来越重要的作用,尤其是在机械设计研究、艺术设计、医疗卫生、汽车设计研发、航空航天等领域有着非常广阔的应用前景。
<正>[问]北方工程,在今年于室内新做了苯板保温,未做苯板保温前,仅在墙角部有湿渍的痕迹,但没有像现在这样有霉斑,请大家帮助应如何处理·
承受复杂荷载的工程结构、构件和零件多用金属材料制成,要保证它们的安全服役,需要透彻了解复杂加载条件下金属材料的塑性行为并建立合理的本构模型。由于变形机制的复杂性,
暨阳学院园林类专业大学生实践动手能力强,思维活跃,艺术气息浓,怀疑精神和创业意识强。本文分析了新时期"95后"大学生思想政治教育的内涵、特点和挑战,介绍了暨阳学院园林类