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5-氨基乙酰丙酸（5-aminolevulinic acid,ALA）是生物合成卟啉、血红素、VB12等四吡咯类化合物的中间体,在农业、医药以及生物技术领域有着重要的应用价值。目前,重组大肠杆菌发酵法生产ALA的技术已经得到了广泛的研究,但是从发酵液中分离纯化ALA的工作鲜有报道。本文的研究目的即为建立一条从重组大肠杆菌发酵液中分离纯化ALA的新工艺,并获得高纯度的产品,为其工业化生产奠定坚实的技术基础。本文以磷酸二（2-乙基己基）酯（D2EHPA）为萃取剂,正己醇为稀释剂,分别研究了D2EHPA的体积浓度、初始水相pH、初始ALA浓度、温度、相比和级数对萃取平衡的影响。采用盐酸对负载ALA的有机相反萃取,研究了盐酸浓度、温度、相比和级数对反萃取平衡的影响。确定了ALA萃取的较优工艺条件:D2EHPA的体积浓度50%,萃取温度20℃,初始水相pH6.5,相比R为0.5,二级萃取;反萃取温度30℃,反萃取相盐酸浓度1mol/L,相比r为0.5,一级反萃取。研究了发酵液中ALA的粗分离工艺。采用中空纤维超滤膜组件处理带菌的发酵液,超滤过程ALA的回收率为86.5%,脱色率为54.4%;超滤透过液用反渗透的方法除水浓缩,收率为93.2%。采用优化后的工艺对反渗透浓缩液进行萃取.反萃取,ALA的总收率为79.8%,产物的HPLC纯度为36.2%。研究了影响ALA分离的主要因素,分别采用延长发酵时间和活性炭脱色的方法降低前体和色素杂质的含量。脱色过程ALA的回收率为99.3%,脱色率为89.8%。粗分离工艺的ALA总回收率为63.9%。探索了5-氨基乙酰丙酸盐酸盐（ALA·HCl）的精制纯化工艺。65℃下对反萃水相真空旋转蒸发浓缩,产品回收率为99.2%。浓缩液冷却结晶,一级结晶的收率为53.6%,两级结晶的总收率为80.1%,精制纯化过程的总回收率为79.5%,所得白色针状晶体中ALA·HCl的实际纯度为99.5%。重组大肠杆菌发酵液经过膜分离、反应萃取和浓缩结晶后,ALA·HCl的总收率为50.8%。