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金黄色葡萄球菌是一种重要的致病菌，可以引起人和动物的多种疾病，其主要致病物质是毒素和酶，其中杀白细胞素可使白细胞失去吞噬功能，破坏中性粒细胞和巨噬细胞。杀白细胞素是双组分毒素，含F和S两种成分，二者协同作用于白细胞膜上形成孔状结构，溶解白细胞。
本课题采用PCR的方法扩增出金黄色葡萄球菌杀白细胞素F(lukF)基因和S(lukS)基因，分别与pMD18-T载体连接，并转化到BL-21(DE3)大肠杆菌。经PCR和BamHI、SalI双酶切鉴定后，获得的阳性克隆质粒命名为pMD-lukF和pMD-lukS。实验进一步将两个阳性克隆和pET32a(+)表达载体用BamHI/SalI双酶切，回收目的片段，并连接转化到BL-21(DE3)大肠杆菌，构建出表达质粒pET-lukF和pET-lukS。测序结果与GeneBank中公布的序列相比，lukF和lukS同源性均在99％以上，编码的氨基酸序列的同源性均为100％。重组菌pET-lukF/DE3和pET-lukS/DE3经IPTG诱导后进行SDS-PAGE，并用抗Histidine单抗进行WesternBlot分析，结果pET-lukF/DE3表达出分子量约53kDa的蛋白质，pET-lukF/DE3表达出分子量约54kDa的蛋白质，二者分子量大小和DnaStar分析结果也相符，表明目的蛋白成功获得表达。在此基础上，用MagneHisTM蛋白纯化系统对表达的lukF和lukS蛋白进行了纯化，为下一步研究金黄色葡萄球菌杀白细胞素的作用机理和免疫保护作用做了前期准备工作。