目的 体外观察腺病毒载体介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因及羟基无环鸟苷系统(ADV-HSV-Tk／GCV)对人腺样囊性癌细胞(ACC-2及ACC-M)的杀伤作用。方法 分别将人腺样囊性癌细胞细胞株(ACC-2及ACC-M)用腺病毒构建的绿色荧光蛋白按1：10，1：20，1：30转染，在12～36hr内用荧光显微镜观察细胞的转染率。MTT法观察ADV-HSV-TK在不同感染复数MOI(5～60)下以及不同浓度GCV处理时对ACC-2及ACC-M细胞的杀伤作用以及旁观者效应。结果体外研究发现，ACC-2及ACC-M均能够被腺病毒-绿色荧光蛋白转染。最小感染复数为10-20，转染率与感染复数呈正相关。在感染复数为5，GCV为25μg／ml时能够发挥细胞杀伤效应且有剂量依赖性。MTT法检测发现：ACC-2及ACC-M经ADV-HSV-Tk处理后，当GCV为25μg／ml或高于该浓度时，细胞抑制率在38％-66％间；当GCV单独作用时则无明显作用。转染ADV-HSV-Tk的细胞与未转染细胞按不同比例混合作用结果，提示了“旁观者效应”的存在，且转染细胞的比例越高，被杀伤的细胞比例越大。结论 腺病毒-绿色荧光蛋白(Ad-GFP)能够有效地对腺样囊性癌细胞进行体外转染，且有感染复数(MOI)和时间依赖性。腺病毒载体介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因及羟基无环鸟苷系统(ADV-HSV-Tk／GCV)系统能够在低感染复数的情况下抑制腺样囊性癌细胞，然而，其细胞杀伤效率及“旁观者效应”仍有待提高。