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登革病毒(Dengue virus，DENV)感染人体后可引起自限性的登革热(Dengue fever，DF)甚至临床症状较为严重的登革出血热(Dengue hemorrhagic fever，DHF)和登革休克综合征(Dengue shock syndrome，DSS)，是主要在热带、亚热带地区流行的蚊媒传染性疾病，其疫情为近年来发展最快的传染病之一。人群对任何单一型别的DENV初次感染均较敏感，感染后获得对同型病毒比较持久的免疫力，而对异型DENV的再感染存在抗体依赖的感染增强作用(Antibody dependent enhancement，ADE)，很可能引起DHF/DSS，发病率和死亡率均较高。因目前尚无抗DENV药物，感染后的快速诊断和对症治疗尤为重要。 DENV非结构蛋白(non-structural protein，NS)NS5是所有黄病毒属蛋白中最大也是最保守的。NS5蛋白C端70kDa片段(NS5/C70)具有RNA依赖的RNA聚合酶（RNA dependent RNA polymerase，RdRp）活性，对病毒RNA基因组复制起关键作用，有望成为阻断或抑制病毒增殖的靶标。 本研究首先对实验室现存DENV-2NS5基因测序，发现有8个位点发生突变，设计引物做定点突变获得野生型DENV-2NS5基因。先后构建pQE30-NS5与pQE30-NSS/C70两种表达载体，进而建立M15/pQE30-NS5/C70原核表达体系，获得NS5/C70多肽段的可溶性表达并对表达条件进行了优化。 然后，用获得的重组NS5/C70多肽段作为抗原，与四种血清型登革热病人血清反应，并用未被感染的正常人血清做阴性对照，ELISA实验结果显示该重组肽段在血清稀释度为1∶500～1∶16000时，NS5/C70重组多肽段不仅与DENV-2感染者血清表现出强阳性反应，对其他三个型别登革病毒感染者血清也呈现阳性或强阳性反应性。表明该重组产物可用于登革热等的快速或辅助诊断，同时由于其是非结构蛋白NS5的一部分，故该重组多肽有可能用于疫苗研发，而不会引起ADE效应。本研究结果有助于未来抗DENV新型疫苗或诊断试剂的研发。