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目的
探讨不同配伍比例赤芍-桃仁对急性血瘀模型SD大鼠血流变的影响，寻找赤芍-桃仁最佳配伍比例。研究赤芍、桃仁及两药配伍前后主要化学成分在SD大鼠体内的药代动力学过程及组织分布，从药代动力学角度探讨赤芍-桃仁的抗血瘀作用的协同机制。
方法
1.采用75%乙醇加热回流制备赤芍和桃仁两种浸膏，建立赤芍中芍药苷、芍药内酯苷和桃仁中苦杏仁苷含量的高效液相(HPLC)测定方法，并进行方法学验证。色谱柱型号为Inertsil?ODS-3column(150mm×4.6mm，5μm)，流动相为乙腈-0.4%磷酸水(15︰85，v/v)，芍药苷、芍药内酯苷的检测波长为230nm，苦杏仁苷的检测波长为210nm。
2.皮下注射肾上腺素结合冰水浴制备SD大鼠急性血瘀模型，灌胃给予不同配伍比例的赤芍-桃仁浸膏，测定SD大鼠的全血粘度(WBV)、血浆粘度(PV)、红细胞压积(HCT)、血沉(ESR)等血流变学指标，及纤维蛋白原(FIB)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)等凝血功能指标。
3.建立了大鼠血浆中芍药苷、芍药内酯苷和苦杏仁苷含量同时测定的液质连用(LC-MS/MS)方法，色谱柱型号为Inertsil?ODS-3column(150mm×4.6mm，5μm)，流动相为乙腈(含0.1%甲酸)-水(含0.1%甲酸)(60︰40，采用电喷雾电离源(ESI)，正离子多重反应监测(MRM)扫描分析。SD大鼠灌胃给予赤芍、桃仁、赤芍-桃仁(1︰1)浸膏，给药后不同时间点取血，研究主要成分芍药苷、芍药内酯苷和苦杏仁苷在SD大鼠体内的动力学过程。
4.建立SD大鼠组织中芍药苷、芍药内酯苷和苦杏仁苷含量测定的LC-MS/MS方法，研究大鼠灌胃赤芍和桃仁浸膏后在心、肝、脾、肺、肾、脑组织分布动力学。
结果
1.与模型组相比，赤芍、桃仁单独给药组的血流变学和凝血功能相关指标没有显著性改变；赤芍-桃仁(1︰1)的WBV、PV、HCT、ESR、FIB均显著降低(P＜0.05)，PT、TT显著延长(P<0.05)；赤芍-桃仁(1︰2)的WBV、ESR、FIB显著降低(P＜0.05)，TT显著延长(P＜0.05)；赤芍-桃仁(2︰1)对ESR显著升高(P＜0.05)，对TT明显延长(P＜0.01)。
2.在本研究建立的HPLC含量测定方法中，芍药苷、芍药内酯苷和苦杏仁苷的保留时间分别为10.3、8.6和5.3min，经专属性、精密度、稳定性、重复性、加样回收率等方法学考察，该方法稳定、可靠，可用于药材浸膏的含量测定。制备得到赤芍和桃仁两种浸膏，赤芍浸膏中芍药苷含量为29.80μg·mL-1，芍药内酯苷含量为10.69μg·mL-1，桃仁浸膏中苦杏仁苷含量为20.91μg·mL-1。
3.在本研究LC-MS/MS条件下，各成分保留时间合适，经专属性、精密度、准确度、稳定性、回收率和基质效应等方法学考察，符合《生物样品定量分析方法验证指导原则》要求，适用于SD大鼠体内芍药苷、芍药内酯苷和苦杏仁苷的药代动力学研究。相对于单独给药组，配伍给药组中的芍药苷、芍药内酯苷和苦杏仁苷的最大血药浓度(Cmax)、药时曲线下面积(AUC(0-t))明显升高，同时达峰时间(Tmax)均延长，半衰期(t1/2z)变短。
4.单独给药组中，芍药苷2h肝脏中的分布最多，其次是肾、肺、心、脾、脑。与单独给药组相比，配伍后芍药苷在组织中的含量减少，在配伍组织中依然在肝组织中的分布最多，其次是肾、心、肺、脾、脑。与单独给药组相比，配伍后芍药内酯苷在各组织中含量减少。同时，苦杏仁苷在心脏中的含量增多，在脑组织中均没有分布，在其余组织中的含量减少。
结论
1.赤芍-桃仁不同配比对急性血瘀大鼠模型的血流流变学均有不同程度的改善,其中1︰1组有极显著的作用，揭示了两者配伍可能发生了协同增效作用。
2.赤芍、桃仁单独及配伍后药代动力学结果显示，配伍后SD大鼠血浆中芍药苷、芍药内酯苷浓和苦杏仁苷浓度均显著增加，两者配伍后主要活性成分血药浓度增加，可能为其协同增效的物质。
3.配伍后芍药苷、芍药内酯苷和苦杏仁苷在组织肝、脾、肺、肾组织中的含量在大部分时间点均减少，配伍后减少了在组织中的分布，与前面血药浓度结果一致，两者具有协同增效的配伍特点。
探讨不同配伍比例赤芍-桃仁对急性血瘀模型SD大鼠血流变的影响，寻找赤芍-桃仁最佳配伍比例。研究赤芍、桃仁及两药配伍前后主要化学成分在SD大鼠体内的药代动力学过程及组织分布，从药代动力学角度探讨赤芍-桃仁的抗血瘀作用的协同机制。
方法
1.采用75%乙醇加热回流制备赤芍和桃仁两种浸膏，建立赤芍中芍药苷、芍药内酯苷和桃仁中苦杏仁苷含量的高效液相(HPLC)测定方法，并进行方法学验证。色谱柱型号为Inertsil?ODS-3column(150mm×4.6mm，5μm)，流动相为乙腈-0.4%磷酸水(15︰85，v/v)，芍药苷、芍药内酯苷的检测波长为230nm，苦杏仁苷的检测波长为210nm。
2.皮下注射肾上腺素结合冰水浴制备SD大鼠急性血瘀模型，灌胃给予不同配伍比例的赤芍-桃仁浸膏，测定SD大鼠的全血粘度(WBV)、血浆粘度(PV)、红细胞压积(HCT)、血沉(ESR)等血流变学指标，及纤维蛋白原(FIB)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)等凝血功能指标。
3.建立了大鼠血浆中芍药苷、芍药内酯苷和苦杏仁苷含量同时测定的液质连用(LC-MS/MS)方法，色谱柱型号为Inertsil?ODS-3column(150mm×4.6mm，5μm)，流动相为乙腈(含0.1%甲酸)-水(含0.1%甲酸)(60︰40，采用电喷雾电离源(ESI)，正离子多重反应监测(MRM)扫描分析。SD大鼠灌胃给予赤芍、桃仁、赤芍-桃仁(1︰1)浸膏，给药后不同时间点取血，研究主要成分芍药苷、芍药内酯苷和苦杏仁苷在SD大鼠体内的动力学过程。
4.建立SD大鼠组织中芍药苷、芍药内酯苷和苦杏仁苷含量测定的LC-MS/MS方法，研究大鼠灌胃赤芍和桃仁浸膏后在心、肝、脾、肺、肾、脑组织分布动力学。
结果
1.与模型组相比，赤芍、桃仁单独给药组的血流变学和凝血功能相关指标没有显著性改变；赤芍-桃仁(1︰1)的WBV、PV、HCT、ESR、FIB均显著降低(P＜0.05)，PT、TT显著延长(P<0.05)；赤芍-桃仁(1︰2)的WBV、ESR、FIB显著降低(P＜0.05)，TT显著延长(P＜0.05)；赤芍-桃仁(2︰1)对ESR显著升高(P＜0.05)，对TT明显延长(P＜0.01)。
2.在本研究建立的HPLC含量测定方法中，芍药苷、芍药内酯苷和苦杏仁苷的保留时间分别为10.3、8.6和5.3min，经专属性、精密度、稳定性、重复性、加样回收率等方法学考察，该方法稳定、可靠，可用于药材浸膏的含量测定。制备得到赤芍和桃仁两种浸膏，赤芍浸膏中芍药苷含量为29.80μg·mL-1，芍药内酯苷含量为10.69μg·mL-1，桃仁浸膏中苦杏仁苷含量为20.91μg·mL-1。
3.在本研究LC-MS/MS条件下，各成分保留时间合适，经专属性、精密度、准确度、稳定性、回收率和基质效应等方法学考察，符合《生物样品定量分析方法验证指导原则》要求，适用于SD大鼠体内芍药苷、芍药内酯苷和苦杏仁苷的药代动力学研究。相对于单独给药组，配伍给药组中的芍药苷、芍药内酯苷和苦杏仁苷的最大血药浓度(Cmax)、药时曲线下面积(AUC(0-t))明显升高，同时达峰时间(Tmax)均延长，半衰期(t1/2z)变短。
4.单独给药组中，芍药苷2h肝脏中的分布最多，其次是肾、肺、心、脾、脑。与单独给药组相比，配伍后芍药苷在组织中的含量减少，在配伍组织中依然在肝组织中的分布最多，其次是肾、心、肺、脾、脑。与单独给药组相比，配伍后芍药内酯苷在各组织中含量减少。同时，苦杏仁苷在心脏中的含量增多，在脑组织中均没有分布，在其余组织中的含量减少。
结论
1.赤芍-桃仁不同配比对急性血瘀大鼠模型的血流流变学均有不同程度的改善,其中1︰1组有极显著的作用，揭示了两者配伍可能发生了协同增效作用。
2.赤芍、桃仁单独及配伍后药代动力学结果显示，配伍后SD大鼠血浆中芍药苷、芍药内酯苷浓和苦杏仁苷浓度均显著增加，两者配伍后主要活性成分血药浓度增加，可能为其协同增效的物质。
3.配伍后芍药苷、芍药内酯苷和苦杏仁苷在组织肝、脾、肺、肾组织中的含量在大部分时间点均减少，配伍后减少了在组织中的分布，与前面血药浓度结果一致，两者具有协同增效的配伍特点。