【摘 要】
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目的及意义:为研究HPV-16 E6特异性siRNA能否抑制宫颈癌CaSki细胞株中HPV-16 E6基因的表达,以观察特异性抑制E6基因对宫颈癌细胞的作用。为宫颈癌的基因治疗提供实验基础和理
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目的及意义:为研究HPV-16 E6特异性siRNA能否抑制宫颈癌CaSki细胞株中HPV-16 E6基因的表达,以观察特异性抑制E6基因对宫颈癌细胞的作用。为宫颈癌的基因治疗提供实验基础和理论依据。方法:构建真核表达HPV-16 E6基因siRNA重组质粒,体外转染CaSki细胞后检测E6 mRNA表达变化及E6主要作用靶分子P53的蛋白变化;流式细胞术分析细胞周期并检测细胞凋亡情况。并观察CaSki细胞转染干扰质粒后增殖情况。结果:特异shRNA表达质粒转染CaSki细胞后明显降低了E6 mRNA水平,且p53蛋白水平增高。流式细胞仪测定发现细胞停滞在G0-G1期,细胞的增殖受到抑制并有细胞凋亡的发生。结论:1、RNA干扰沉默CaSki细胞中整合的HPV-16 E6基因的表达;2、使细胞中抑癌蛋白P53水平增高,导致肿瘤细胞生长停滞并诱导凋亡。
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