中药补中益气汤提取物化学成分及其调控鼠骨髓间充质干细胞增殖活性的实验研究

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补中益气汤出自金代李东垣的《脾胃论》,被公认为当今十大名方之一。临床应用特别广泛,据统计几乎覆盖了内、外、妇、儿、皮肤、五官、男科等临床各科疾病共计107种。但补中益气汤提取物中化学成分调控MSCs增殖活性的研究至今尚未有报道,本文结合各种传统和现代的分离、鉴定方法对其进行研究。 本研究以乙酸乙酯作为溶剂提取补中益气汤药剂,经传统的硅胶柱层析,石油醚—乙酸乙酯梯度洗脱,得到24个组分,记为K—1~K—24。用四甲基偶氮唑盐(MTT)法研究它们对MSCs的增殖作用,结果显示,K—7、K—11、K—13、K—14、K—15、K—17、K—18、K—19和K—20能促进MSCs的增殖(P<0.05);其中K—9和K—24具有抑制作用,其他样品对MSCs的增殖作用不显著(P>0.05),不具统计学意义。 K—24为白色针状晶体,熔点和红外光谱数据与β—谷甾醇一致,确定为β—谷甾醇。K—9为无色晶体,经H—NMR、C—NMR和X射线单晶衍射分析,其结构为由两个六员环和一个五员环内酯组成的倍半萜内酯。经MTT法显示它们都有很强抑制MSCs体外增殖的活性。 利用GC—MS技术研究K—11、K—12、K—17和K—21的挥发性成分,探讨化学组成含量与调控鼠骨髓间充质干细胞增殖活性的关系,结果初步表明:四个样品中的脂肪酸酯可能起到调控骨髓间充质干细胞的增殖作用,但只有在浓度不太高时才能表现出增殖活性,浓度过高反而会降低MSCs增殖活性。
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