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目的: 运用RNA干扰技术沉默大鼠小胶质细胞的TNF-α基因，观察小胶质细胞分泌TNF-α的功能是否得到抑制，以及β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)对海马神经元的促凋亡作用是否得到改善，探讨小胶质细胞源性炎性反应在AD发病中的可能作用途径和机制，以期为阿尔茨海默病（AD）基因水平上的抗炎治疗提供理论依据。 方法: 构建针对TNF-α编码区表达小干扰RNA(siRNA)的载体，然后转染小胶质细胞使之转录siRNA，再以Aβ1-42刺激，得到的条件培养基作用于原代培养的海马神经元，用western blot法检测海马神经元内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和硝基酪氨酸(nitrotyrosine)的表达水平，用TUNEL法和DNA Ladder凝胶电泳法观察海马神经元的凋亡情况，同时用激酶活性测定法测定凋亡相关蛋白casepase-3的激活程度，并进行统计学分析。 结果: 针对SD大鼠TNF-α mRNA编码区基因序列的4个不同位点，成功构建了小干扰RNA(siRNA)的表达载体pGPU6/EGFP/Neo-shRNA:PGPU6/EGFP/Neo-tnf-rat-500,GPU6/EGFP/Neo-tnf-rat-535,PGPU6/EGFP/Neo-tnf-rat-564，PGPU6/EGFP/Neo-tnf-rat-153及阴性对照(shNC)。以LipofectamineTM2000作为转染试剂将构建的4个载体质粒分别转染小胶质细胞，western blot证明PGPU6/EGFP/Neo-tnf-rat-153的RNA干扰效率最高。western blot法进行检测神经元内iNOS和硝基酪氨酸(nitrotyrosine)的水平，可观察到转染组iNOS及硝基酪氨酸的表达量比对照组明显降低。TUNEL和DNA电泳鉴定神经元细胞凋亡程度，转染组比对照组明显减轻。 结论: 1.采用“营养缺失法”，并结合“摇床分离法”能够获得高纯度的小胶质细胞; 2.采用无血清培养法能够获得高纯度的海马神经元细胞; 3.Aβ1-42能激活原代小胶质细胞并促进其分泌TNF-α蛋白; 4.激活后的小胶质细胞条件培养基作用于原代培养的海马神经元，能诱导海马神经元凋亡及促进神经元内iNOS和硝基酪氨酸(nitrotyrosine)的表达水平增高; 5.表达载体PGPU6/EGFP/Neo-tnf-rat-153对TNF-α的表达具有RNA干扰效应; 6.通过RNA干扰技术降低TNF-α的表达，对Aβ1-42诱导的海马神经元凋亡具较明显的有干预效果。