有氧运动对雄性高脂膳食大鼠生殖细胞凋亡的研究

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研究目的:探讨高脂膳食对雄性大鼠睾丸生殖细胞凋亡的影响,并初步揭示有氧运动对雄性高脂膳食大鼠睾丸生殖细胞凋亡的干预作用。研究方法:将32只健康的雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠随机分为4组:正常对照组(C)、高脂膳食组(HF)、普通运动组(CE)、高脂膳食运动组(HE),每组8只;C组和CE组给予普通饲料喂养,HF组和HE组给予高脂、高热量饲料喂养。运动方案为10周60min无负重游泳运动,每周6天。实验结束后检测大鼠血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C、MDA、 SOD; ELISA法测定T、FSH、LH、Caspase-3、Cytc,用流式细胞仪检测大鼠精子凋亡情况;RT-PCR检测大鼠睾丸组织中Caspase-3和Cytc mRNA的表达量;HE染色观察睾丸组织形态学的变化。研究结果:1.经HE染色光镜下观察大鼠睾丸组织形态,发现C组生精小管内各级生精细胞发育正常,排列整齐。CE组睾丸生精小管间隙变宽,管中可见成熟精子。HF组睾丸组织生精小管管壁变薄,生精细胞数量减少且排列紊乱,成熟精子数量明显减少,偶见细胞脱落现象,个别大鼠生精细胞与基底膜之间出现脱离,生精细胞成团脱落于管腔中。HE组生精小管内各级生精细胞基本发育正常,偶可见细胞脱落现象,生精小管间可见疏松的间质组织。2.10周后CE组与C组相比,体重极显著下降,睾周脂显著降低,TG显著减少,HDL极显著增加,Lee’s指数、精子总数、畸形率、活动率、TC、以及LDL无显著性差异。HF组与C组相比,体重、Lee’s指数、睾周脂、畸形率均极显著上升,精子总数显著减少,活动率极显著下降,TC、LDL极显著上升,TG、HDL无明显差异。HE组与HF组相比,体重、睾周脂、畸形率均极显著降低,Lee’s指数显著降低,活动率显著增加,TC、TG、HDL、LDL以及精子总数无显著性差异。3.与C组相比,CE组大鼠血清中T水平显著升高,FSH与LH水平极显著升高。HF组与C组相比,大鼠血清中FSH、LH、T水平显著降低。HE组与HF组相比,FSH与LH水平显著升高,大鼠血清中T水平有所升高,但差异不显著。通过方差分析可知,高脂膳食可引起大鼠血清中FSH与LH水平降低,而有氧运动使得血清FSH与LH水平升高。4.CE组与C组相比,大鼠血清中SOD的活性显著增加,MDA的含量显著降低;HF组大鼠血清中SOD的活性极显著降低,MDA的含量极显著升高,HE组比HF组血清SOD的活性极显著增加,MDA的含量极显著降低。通过单因素方差分析可知,高脂膳食可引起大鼠血清中SOD含量下降及MDA含量上升,而有氧运动可以升高SOD含量及降低MDA含量。5.大鼠睾丸组织中凋亡细胞情况:与C组相比,CE组睾丸组织中精子凋亡率显著降升高,HF组睾丸组织中精子凋亡极显著升高。HE组与HF组相比,睾丸组织中精子凋亡率显著降低。通过方差分析可知,高脂膳食可使得睾丸组织中精子凋亡增加,而有氧运动可缓解这一情况。6.CE组与C组相比,大鼠睾丸组织中Caspase-3和Cytc均有所降低但差异不显著,Caspase-3和Cytc mRNA表达量显著降低。HF组与c组相比,大鼠睾丸组织中Caspase-3极显著升高,Cytc显著升高;Caspase-3和Cytc mRNA表达量极显著增加。HE组与HF组相比,Caspase-3极显著降低,Cytc显著降低,Caspase-3和Cytc mRNA表达量极显著下降。结论:1.长期高脂膳食诱导肥胖大鼠脂质代谢异常,可使大鼠睾丸组织结构发生变化,精子总数减少,活动率下降,畸形率上升,而且能够使得精子凋亡明显增多。2.长期高脂膳食诱导大鼠血清中FSH、LH、T水平下降,同时脂质过氧化加强,可能是因为机体内自由基含量增加。3.长期高脂膳食会引起大鼠精子凋亡增加,睾丸组织中Caspase-3、Cytc表达增加,而有氧运动可使大鼠精子凋亡减少,Caspase-3和Cytc表达降低,提示有氧运动通过Cytc、Caspase-3参与的线粒体凋亡途径干预肥胖大鼠机体内的精子凋亡。4.高脂膳食诱导大鼠精子凋亡率增加,但高脂喂养的同时施加游泳运动后,大鼠精子凋亡率减少,提示游泳运动可有效缓解大鼠精子凋亡。
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