线粒体靶向抗氧化剂Mitoquinone对人精子冻融氧化应激损伤的保护作用

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目的:探讨线粒体靶向抗氧化剂Mitoquinone(Mito Q)对冻融人精子的保护作用方法:选取60份健康生育男性精液标本,每份精液一式6份,不含Mito Q者设为对照组(G0),而G1、G2、G3、G4、G5实验组混合液中分别含有2nmol/L、20nmol/L、200nmol/L、2μmol/L、20μmol/L Mito Q。37℃孵育1h后检测各组中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和线粒体膜电位(MMP)变化。根据上述检测结果选取合适Mito Q浓度B1、B2组用于精子冷冻保存,B0组未添加Mito Q,B1、B2组在精子冷冻保护液中分别含有200nmol/L和2μmol/L Mito Q,进行冷冻保存,检测冷冻复苏后的ROS水平、MDA含量和MMP改变。结果:新鲜精液添加Mito Q孵育后,G3组和G4组前向运动精子百分率[(30.8±10.2)%和(32.7±13.5)%]和总体活动率[(70.6±9.0)%和(70.3±11.9)%]显著高于G0组[(17.6±5.0)%、(54.9±11.5)%](P<0.05);随着Mito Q浓度的增加,ROS水平呈下降趋势,G3、G4、G5组(分别为86.5±31.6、93.6±42.0、45.1±15.0)显著低于G0组(160.8±39.7)(P<0.05);MDA含量G3、G4组[分别为(0.9±0.5)、(0.9±0.5)μmol/mg]明显低于G0组[(1.9±1.1)μmol/mg](P<0.05),而G5组[(1.7±0.7)μmol/mg]不但没有降低,反而显著高于G3、G4组(P<0.05);与G0组MMP(1701±251)相比,G5组(1156±216)显著降低(P<0.05),而G1、G2、G3、G4组分别为(1810±298、1995±437、1950±334、1582±314)无明显变化。冷冻复苏后各组前向运动精子百分率和总体活动率均较新鲜精液明显下降(P<0.01),B1组前向运动精子百分率和总体活动率均较B0组明显改善(P<0.05):其中,前向运动运动精子百分率分别为[(3.2±2.3)%]和[(0.8±0.6)%,总体活动率分别为[(43.0±9.5)%]和(26.5±11.4)%];B1组ROS[(34.6±12.3)]和B2组[(37.0±10.5)]均较B0组[(56.9±14.3)]显著下降(P<0.05),B1组MDA[(1.4±0.5)μmol/mg]和B2组[(1.4±0.6)μmol/mg]均较B0组[(2.6±1.0)μmol/mg]显著下降(P<0.05),B1组MMP[(1010.0±131.5)]和B2组MMP(880.6±12.6)]均显著高于B0组(721.1+24.8)](P<0.05)。结论:在精液冻存液中添加200nmol/L的Mito Q能有效提高人精子质量,可作为精液冷冻保护添加剂用于精液的冷冻保存。
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