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目的:在结肠癌SW620细胞系中，探讨proteinkinaseCα(PKCα)在TF-Vlla-PAR2信号转导轴中是否被激活以及其在结肠癌细胞株增殖、迁移与生存中的作用;进一步分析该过程中PKCα的下游信号分子及其调控的效应分子，以阐明TF-Vlla-PAR2-PKCα促进SW620细胞增殖、迁移与生存的分子机制。
方法:(1)采用因子VIla(10nM)、PAR2激动剂（PAR2-AP，100μM）以及PKC激动剂佛波酯(PMA，100nM)等处理SW620细胞不同时间，westernblot检测其PKCα与p-PKCα的表达，免疫荧光试验观察PKCα的分布情况。(2)借助抑制抗体（α-TF、α-PAR2）、同型对照抗体(mopc-21)、PKCα抑制剂（safingol，10μM）及ERK1/2抑制剂(U0126，10μM)进行抑制试验，westernblot检测其PKCα与p-PKCα，ERK1/2与p—ERK1/2以及NF-κB与p-NF-κB的表达，探讨PKCα上下游的信号分子。(3)采用PMA(100nM)、Vlla(10nM)及PKCα抑制剂(safingol,10μM)等不同组合刺激SW620细胞后，MTT探测细胞增殖能力，Transwell试验检测细胞迁移潜能，流式细胞术(FCM)评估细胞的生存能力。(4)采用Vlla(10nM)、PKCα抑制剂（safingol,10μM）以及NF-κB抑制剂(PDTC，5μM)等不同组合刺激SW620细胞后，实时荧光定量PCR与westernblot检测MMP-9，caspase-3，TF，与Bcl-2/Bax的表达，TF活性检测试剂盒检测TF活性。
结果:(1)与medium组比较，Vlla(10nM)、PAR2-AP(100μM)及PMA(100nM)均能明显促进PKCα的磷酸化，而对PKCα的表达没有显著性影响。免疫荧光结果表明，medium组PKCα主要分布在胞浆，分布无明显规律，核内未探测到PKCα的表达;Vlla、PAR2-AP、PMA处理组的PKCα主要分布在核周，并且核内亦有少量表达。(2)与medium组比较，抗TF或抗PAR2抗体均能明显减弱VIla与PAR2-AP诱导的p-PKCα的表达(p＜0.05)，而同型对照抗体（mopc-21）则没有这种抑制效果(P＞0.05)。与Vlla处理组比较，PKCα抑制剂（safingol，10μM）能显著抑制Vlla对下游信号分子ERK1/2及NF-KB的磷酸化(p＜0.05)。(3)与medium组比较，Vlla(10nM)及PMA(100nM)均能明显促进细胞的增殖、迁移与生存(p＜0.05);这一促进增强作用能被PKCα抑制剂(safingol，10μM)阻断(p＜0.05)。(4)与medium组比较，Vlla(10nM)能诱导caspase-3与Bax表达明显下调，MMP-9、TF与Bcl-2表达以及TF活性明显上调，这一诱导作用能被PKCα抑制剂(safingol，10μM)与NF-κB抑制剂(PDTC，5μM)阻断(p＜0.05)。
结论:(1)在结肠癌细胞株SW620中，PKCα能够被因子Vlla与PAR2-AP激活。
(2)Vlla依赖TF及PAR2激活PKCα，进而活化下游的ERK1/2与NF-κB。
(3)PKCα激活对于因子Vlla促进SW620细胞的增殖、迁移与生存是非常必要的。
(4)PKCα激活参与了因子Vlla诱导的MMP-9、caspase-3、TF与Bcl-2/Bax效应分子表达。