与拟南芥突变体lpt1、lks1性状相关蛋白质的分离、鉴定与功能分析

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:hejiankimi
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利用拟南芥耐低磷突变体lpt1-1、低钾敏感突变体lks1-1材料,通过对其与野生型蛋白表达差异的分析、差异表达蛋白的质谱分析、幼苗表型分析等,对与耐低磷、低钾敏感性状相关的基因及其编码产物的功能进行了初步分析。 对GapC-2基因的Northern blot分析表明,低磷胁迫诱导其转录增强;与野生型比较,lpt1-1突变体中GapC-2基因在地上部受低磷胁迫诱导的持续时间更长。低磷高渗胁迫也诱导其表达增强,且在lpt1-1突变体与野生型植株中的表达增强趋势无明显差异;在野生型植株地上部组织中,受低磷高渗诱导表达增强的时间比受单独低磷诱导表达增强的时间持久。对两个独立的GapC-2基因T-DNA插入突变体株系的表型分析表明,突变体对低磷或低磷高渗胁迫均表现出较野生型更敏感的性状;而恢复突变体则表现与野生型一致的表型。研究结果说明,三磷酸甘油醛脱氢酶(GapC-2)可能通过调节植物体内磷的分配和利用而参与了植物应答低磷胁迫的过程。 lks1-1具有在低钾胁迫下生长受抑且冠部较早表现失绿变黄的性状。对lks1-1与野生型幼苗在正常和低钾条件下生长12 h、48 h的地上部、根总蛋白质进行2D-E分离,在地上部总蛋白质pH 9~10和pH 5~7区域分析到6个差异表达蛋白质。质谱鉴定后,其中3个在拟南芥蛋白质数据库中比对到同源相关性显著的已知蛋白质。其名称及在低钾胁迫下表达的主要差异特征分别为:谷胱甘肽硫转移酶6(GST6),在野生型植株中表达增强;锰超氧化物歧化酶(MSD1),在lks1-1突变体植株中表达增强;NADP类肾上腺皮质铁氧还蛋白Fd还原酶,在lks1-1突变体植株中表达增强。在正常培养条件下3个蛋白质表达无明显差异。
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