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“夏刚巴”为毛茛科翠雀属植物蓝翠雀花(Delphiniumcaeruleum Jacq.ex Camb.)的干燥地上部分,生长于海拔2100～4000米的山地草坡或多石砾山坡,在我国主要分布于西藏、四川西部、青海、甘肃等地。《中华本草:藏药卷》记载“味苦,性凉,清热、止泻痢、愈疮,主治肝胆热病、肠热腹泻、痢疾、黄水、疖肿等,内服煎汤2～4g或入丸散外用。”曾有文献报道了该植物的生物碱成分,而未见其他类型成分、相关药理及质量评价研究。1.为了进一步研究蓝翠雀花的化学成分,开发新的中药资源,本文对其进行了较为系统的分离纯化研究。综合运用硅胶、凝胶、氧化铝、大孔树脂等柱层析法及半制备、制备高效液相色谱法,从蓝翠雀花地上部分共分离得到28个单体化合物,利用IR、MS、1D-NMR、2D-NMR等波谱技术,结合相关文献的数据报道及与标准对照品对照法,确定了全部化合物的结构,其中5个为新化合物:蓝翠雀碱A、山奈酚-7-0-6”-对羟基苯甲酰基-β-D-葡萄糖苷、山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖基-(6→1)-α-L-鼠李糖-7-O-6’’’’-对羟基苯甲酰基-β-D-葡萄糖苷、山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖基-(2→1)-β-D-葡萄糖基-(6→ 1)-α-L-鼠李糖-7-O-6”’”-对羟基苯甲酰基-β-D-葡萄糖苷,6-[4’-(6”-对羟基苯甲酰基-β-D-葡萄糖基)苯甲酰基]-D-葡萄糖醇苷,23个为已知化合物:大理翠雀碱乙、大理翠雀碱丙、大理翠雀碱甲、牛扁碱、tatsienine-V、delatisine、vakhmatine、海帕刺桐碱、d-木兰碱、苜蓿素、山奈酚、槲皮素、山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷、芦丁、山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖基-(2→1)-β-D-葡萄糖基-(6→1)-α-L-鼠李糖苷、1,6-二-O-对羟基苯甲酰基-β-D-葡萄糖苷、苯甲酸-2-[(4-甲氧基-3-甲基-1,4-二氧代丁基)氨基]-甲酯、苯甲酸-2-[(4-甲氧基-2-甲基-1,4-二氧代丁基)氨基]-甲酯、对羟基苯甲酸、邻苯二甲酸二丁酯、β-谷甾醇。除牛扁碱和大理翠雀碱乙外,其余26个化合物均为该植物中首次分离得到。2.蓝翠雀花化学成分研究结果表明,其化学成分主要为生物碱类及黄酮类。本文首次采用LC-MS法测定15批(C1-C15)蓝翠雀花药材中11种主要化学成分的的含量,同时采用高分辨LC-MS法对蓝翠雀花中的化学成分进行定性鉴别分析。定量分析:安捷伦6460三重四极杆LC-MS联用仪,Agilent SB-C18色谱柱(2.1×50mm,D.1.8μm),流动相A为乙腈,B为0.1%甲酸水,梯度洗脱:0～12 min,10%～25%A;12～15 min,25～70%A。流速0.4ml/min,柱温30℃,多离子反应监测模式(MRM)。11个对照品中5个为黄酮苷类:HT-1～HT-5,6个为生物碱类:J-1～J-6。15批蓝翠雀花药材中均检测到该11个化学成分,经统计学分析,各批次间其含量均无显著性差异。提示该地区蓝翠雀花药材化学成分总体稳定。对不同采集年份的蓝翠雀花药材中5个黄酮总含量、6个生物碱总含量及该11个化学成分总含量的差异进行统计学分析,结果显示含量均为:2010年>2009年>2008年,其中2008年与2010年均具有显著性差异,而2009年与2010年均无显著性差异。本法简单可行,重复性好,为快速测定蓝翠雀花中两类成分的含量提供了一种可供参考的方法。定性分析:Thermo LC-LTQ Orbitrap XL联用仪,Agilent SB-C18色谱柱(2.1×50mm,D.1.8μm),流动相A为乙腈,B为0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱:0～2 min,5%A;2～8 min,5～8%A;8～20 min,8～12%A;20～30 min,12～14%A;30～45 min,14～30%A。流速0.2ml/min,柱温30℃,二极管阵列检测器。结合相关文献及与对照品对照法,共鉴定了 30个化合物,其中24个为本文化学成分研究中分离得到过的化合物,6个为本文未分离得到过的化合物。该法为蓝翠雀花化学成分分析提供了可靠的方法。3.相关文献报道称翠雀属植物中的部分生物碱对心脏具有一定的药理作用。为探索蓝翠雀花提取物对心脏的作用,本文以青蛙为实验动物,以去乙酰毛花苷为阳性对照,采用八木式管蛙心灌流法,观察、记录蓝翠雀花提取物灌流前后离体蛙心搏动频率及收缩力的变化,分析不同浓度的蓝翠雀花提取物对蛙心活动的影响。结果显示蓝翠雀花总提物对离体蛙心有明显的正性肌力作用,经进一步探索发现,正丁醇萃取部位为其有效部位。浓度分别为50、100、150、200 mg/L的正丁醇萃取物可使正常蛙心的心肌收缩力分别增加至正常的112.0%、128.9%、141.6%、150.2%,且成正相关(r = 0.994,P<0.5);使低钙所致心衰模型的心肌收缩力(正常的31.0%)恢复至正常的49.1%、74.6%、88.4%、103.7%及1%戊巴比妥钠所致心衰模型的心肌收缩力(正常的33.8%)恢复至正常的52.9%、76.9%、89.3%、106.2%,均与浓度成正相关(r分别为0.996,0.994,P<0.5)。所有浓度均对心率无显著性影响。对正丁醇部位中分离得到的7个单体化合物进行活性筛选,结果显示均无活性,未能筛选出活性成分,有待进一步研究。本文对蓝翠雀花进行了较为系统的研究,为今后该藏药材的进一步研究提供了基础,为该属植物的相关研究提供了思路与方法。