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目前,中国约有1400万头奶牛,年产牛奶约3400万吨,奶牛饲养量和产奶量年增长率均约为10%～15%,但是粗蛋白饲料资源不足的缺口越来越大,开发出蛋白饲料利用率高,具备生理活性调节作用的小肽产品是一条行之有效的途径;我国奶牛平均单产奶量仅为4100kg/年,乳蛋白率在2.95%～3.0%之间,而世界奶牛平均单产则达到了5500kg/年,乳蛋白率在3.2%～4.0%之间,美国奶牛平均单产最高达到了8879kg/年,乳蛋白率在3.20%～3.55%之间,奶牛单产水平及乳蛋白含量低成为制约我国奶牛养殖业发展的重要问题,根据小肽的营养作用提高奶牛生产性能是解决问题的一项有效办法。小肽作为营养添加剂已经被广泛的应用到奶牛生产中,但绝大多数小肽产品多是应用酶法或是微生物发酵法采用单一蛋白饲料资源生产的粗品,只是起到了蛋白质营养补充作用,目前尚无报道通过乳酸菌混菌发酵联合酶法生产小肽产品。本实验旨在开发一种小肽产品,在蛋白原料的选取过程中充分考虑它们混合后蛋白质含量及赖氨酸、蛋氨酸的比例,采用能高效分泌蛋白酶的保加利亚乳杆菌、乳酸乳球菌菌种先对混合后的蛋白饲料进行混菌发酵,提高蛋白质、赖氨酸、蛋氨酸的含量,发酵后再经胰蛋白酶、胰酶混酶酶解,有效降低产品中平均肽链长度,提高小肽产品的生物活性能力。本实验所得的研究结果如下:建立了蛋白饲料源进行乳酸菌混菌发酵和酶法结合的小肽生产工艺,本工艺可操作性强,小肽得率较高,酸溶性蛋白占总蛋白含量可达到65%,平均链长度3.44,蛋氨酸含量为2.51%,比原料提高1.67%,赖氨酸含量5.17%,比原料提高1.76%,本实验也建立了小肽的赖氨酸含量HPLC检测方法。在奶牛泌乳中期日粮中添加小肽后产奶量稳中有升,三组受试奶牛(小肽添加量分别占日粮干物质的0.1%,0.3%,0.6%)分别比试验前各提高2.0%、6.1%、7.4%;平均每日每头奶牛分别净收益1.89元、3.57元、4.05元;投入产出比分别为1:11.4,1:11.8,1:7.0。且乳中乳脂率、乳蛋白含量升高较快,乳脂率由原来的3.77%、3.77%、3.77%上升到3.80%、3.85%、3.88%,分别提高0.8%、2.1%、2.9%,乳蛋白由原来的2.95%、2.96%、2.96%上升到2.99%、3.01%、3.02%,分别提高1.4%、1.7%、2.0%,与各组试验前相比差异极其显著(P <0.01),乳糖和干物质略有升高,与试验前各组比较差异显著(P<0.05)。实验结果表明蛋白饲料源小肽产品可以用于牛奶质量和产奶量的提高。