费氏中华根瘤菌RT19与耐盐有关基因的克隆和功能研究

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 10次 | 上传用户:liongliong468
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本论文利用Tn5-1063a转座子对该菌株进行随机突变,建立了一个容量达30,000个突变株的库,从中筛选获得在0.4mol/LNaCl的FY培养基上不能生长的盐敏感突变株21株。利用Tn5-1063a能够自连成质粒和自我复制的功能,对突变株的基因组DNA进行酶切和自连,并对Tn5插入位置侧翼序列进行测序。结果发现,21株突变株是由于5个基因突变所致,它们是phaA2、phaD2、phaF2、phaG2和metH。其中,有8个突变株是因phaA2突变所致,7个突变株是因phaD2突变所致,2个突变株是因phaF2突变所致,2个突变株是因phaG2突变所致。另外,2个突变株是因metH突变所致。将与phaA2有关的突变株分别命名为RTa-1至RTa-8,将与phaD2有关的突变株分别命名为RTd-1至RTd-7,将与phaF2有关的突变株分别命名为RTf-1和RTf-2,将与phaG2有关的突变株分别命名为RTg-1和RTg-2,而将与metH有关的突变株分别命名为RTh-1和RTh-2。   
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