鲍鱼生殖腺多糖AGP-32主链结构的研究

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鲍鱼生殖腺多糖是一种硫酸酯多糖,经过研究发现鲍鱼多糖具有明显的生理活性,但对于多糖的构效关系尚不能完全明确,结构信息制约着整体的发展。本文采用化学降解法对该多糖进行降解反应,获得鲍鱼生殖腺多糖主链片段,降低了结构研究的难度,进而确定鲍鱼生殖腺多糖主链结构信息。本文采用双酶水解法获得鲍鱼生殖腺粗糖(AGP),并将AGP经过Cellulose DEAE-52和Sepharose CL-6B纯化制备得到均一多糖组分AGP-32,对高碘酸氧化降解法及部分酸水解法降解多糖进行比较,选择最优的降解方法降解多糖,获得多糖主链片段后,对此部分片段采用高碘酸氧化、Smith降解、甲基化及NMR分析。分离纯化后获得鲍鱼生殖腺多糖AGP-32,其分子量大小为86.3kDa,经测定由Man、Rha、GlcUA、Glc、Gal、Xyl、Ara、Fuc 8种单糖组成,其单糖组成比例为5:1:2:1:10:2:1:8。对高碘酸氧化和部分酸水解法降解比较,结果显示部分酸水解方法适合于本实验对多糖的降解,并且获得由Glc、Gal、Man组成,且分子量大小为50kDa的主链多糖片段。主链多糖部分经高碘酸氧化、Smith降解后确定核心部分单糖组成为Glc和Gal,构成比例为3:1。其可能连接键为(1→3)或者(1→3,6)糖苷键组成。甲基化分析同样印证了鲍鱼生殖腺主链多糖的单糖组成为Glc和Gal,且构成比例为3:1,并最终确定Glc和Gal连接键型为(1→3)糖苷键。最后,NMR分析得出鲍鱼生殖腺多糖AGP-32主链多糖由β型Glc和β型Gal,综合分析多糖结构如下:-[3)-β-D-Glc(1→3)-β-DGal(1→3)-β-D-Glc(1→3)-β-D-Glc(1→]n-。
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