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目的：通过对骨关节炎患者关节软骨细胞金属蛋白酶抑制剂3(Timp-3)启动子区甲基化状态及Timp-3蛋白表达的检测,探讨Timp-3启动子区甲基化在骨关节炎(OA)发生、发展中的作用。方法：采用亚硫酸氢钠(Sodium-Bisulfite)方法处理基因组DNA,甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)方法检测Timp-3基因启动子甲基化情况。免疫组化方法检测Timp-3蛋白表达。实验分为两组：对照组(14例,平均年龄40±8.97岁)和OA患者组(35例,平均年龄65±8.26岁)。采用SPSS17.0统计分析软件进行分析,行χ2检验或Fisher’s确切概率法检验和Spearman等级相关分析。结果：1.OA患者与健康人软骨细胞Timp-3启动子区甲基化状态比较OA患者组与健康人对照组软骨细胞Timp-3启动子区甲基化阳性率分别为74.3%(26/35)和35.7%(5/14),经χ2检验,两组间差异有统计学意义(χ2=6.402,P=0.0114)。2.OA患者与健康人软骨细胞Timp-3蛋白表达比较14例健康人软骨细胞Timp-3蛋白10例有表达,而35例OA患者软骨细胞有24例Timp-3蛋白不表达的,经χ2检验,OA患者组软骨细胞Timp-3蛋白与健康人对照组比较,差异有显著性意义(χ2=6.533,P=0.0106)。3.OA患者软骨细胞Timp-3启动子区与蛋白表达相关分析26例Timp-3启动子甲基化阳性的OA患者中,有21例蛋白表达阴性；而24例Timp-3蛋白表达阴性的OA患者中,有21例Timp-3启动子甲基化阳性,经Spearman等级相关分析,Timp-3启动子甲基化与蛋白表达呈显著负相关(rs=-0.447,P<0.005)。结论：骨关节炎患者关节软骨细胞TIMP3启动子区甲基化水平高于对照组。TIMP3启动子区甲基化状态与TIMP3蛋白表达呈负相关。TIMP3启动子区甲基化改变所致TIMP3蛋白表达改变可能与骨关节软骨退变有关。