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本文通过寻找与乙型肝炎病毒e抗原相关的宿主细胞蛋白以及诱导变化的差异性蛋白,旨在了解e抗原在乙型肝炎病毒的感染以及病理进程中的作用。 结果显示,HSP47是一个与HBeAg很好相互作用的蛋白,它主要功能是胶原蛋白的正确折叠加工,促进胶原蛋白分子的分泌成熟,HBeAg在纤维化形成中可能起到非常关键的作用。HBeAg还在肝星形细胞中诱导HSP47的表达量提高,并可以通过感染肝细胞表达分泌细胞因子等旁分泌途径活化肝星形细胞中的HSP47的表达,从而促进Ⅰ型胶原蛋白的分泌,引起肝纤维化的形成。而HBeAg还可以通过诱导TGF-β途径激活肝星形细胞,促进细胞增殖,这种激活可以被阻断TGF-β途径的抗体所终止。HBeAg本身也有激活肝星形细胞促进其增殖的能力。 综上实验结果表明,乙型肝炎病毒e抗原与肝纤维化的形成有着密切的关系,通过不同的方式不同的途径,都可以参与诱导胶原蛋白的分泌表达,进而促进肝纤维化的发生、发展,为我们了解乙肝病毒感染引起的肝纤维化的分子机制提供了新的理论依据,为肝纤维化的治疗也提供了新的思路。 本论文还设计合成了特异性靶向乙型肝炎病毒mRNA的反义RNA寡核苷酸P-2987,X-60,andX-519。在细胞模型中,转染2μM的反义RNA寡核昔酸,这三条寡核苷酸可以明显抑制HBV的复制和抗原表达。在HBV转基因鼠模型中,尾静脉注射反义RNA寡核苷酸,结果表明肝脏中HBV的复制得到了抑制,但是血清中抗原含量和HBVDNA拷贝数依旧高表达,没有明显变化。反义RNA寡核苷酸X-519与脂质体的复合物可以增强其对于HBV在肝脏中复制的抑制作用。在通过高压尾静脉注射pHBV1.3质粒建立的HBV急性感染模型中,反义RNA寡核苷酸X-519可以显著的抑制HBV在肝脏中的复制以及血清中病毒抗原水平和DNA拷贝数。上述实验结果说明,X-519及其与脂质体的复合物对于HBV的复制和抗原表达起到明显的抑制作用,可能作为一种潜在的针对HBV的基因治疗药物。