【摘 要】
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目的:通过3%葡聚糖硫酸钠（DSS）溶液自由饮用复制小鼠溃疡性结肠炎（UC）模型,探究氧化苦参碱对UC小鼠结肠组织细胞焦亡的影响以及其相关作用机制。方法:SPF级雄性C57BL/6小鼠随机选取10只作为空白对照组,其余给予3%DSS水溶液自由饮用7天,第8天根据模型动物疾病活动指数（DAI）分为DSS组、control组、DSS+120mg/kg oxymatrine组、DSS+60 mg/kg
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目的:通过3%葡聚糖硫酸钠（DSS）溶液自由饮用复制小鼠溃疡性结肠炎（UC）模型,探究氧化苦参碱对UC小鼠结肠组织细胞焦亡的影响以及其相关作用机制。方法:SPF级雄性C57BL/6小鼠随机选取10只作为空白对照组,其余给予3%DSS水溶液自由饮用7天,第8天根据模型动物疾病活动指数（DAI）分为DSS组、control组、DSS+120mg/kg oxymatrine组、DSS+60 mg/kg oxymatrine组、DSS+30 mg/kg oxymatrine组,模型建立后给药组给予氧化苦参碱,control组、DSS组给予等量蒸馏水,每日1次,连续给药干预7天。称量实验期间小鼠每日体质量,隔日记录小鼠DAI评分,末次给药12h后称取小鼠回盲瓣至肛门肠段自然长度和质量比值,作为小鼠结肠长度质量比;称取体质量,计算回盲瓣至肛门肠段的质量系数,作为结肠质量系数;观察结肠黏膜形态损伤情况进行大体形态损伤（CMDI）评分;HE染色观察结肠病理结构改变和炎性细胞浸润情况对结肠组织病理学损伤（HS）进行评分;ELISA法检测小鼠结肠组织MPO含量和血清D-LA、DAO、IL-1β、IL-6、TNF-α含量;WESTERN BLOT法检测各组小鼠结肠黏膜NF-κBp65、磷酸化NF-κBp65、细胞核磷酸化NF-κBp65、TLR4、My D88、HMGB1、乙酰化HMGB1、SIRT1、NLRP3、caspase-1p45/p10蛋白表达情况;16sr RNA基因V3-V4区扩增子测序法检测小鼠粪便中菌群组成结构,物种丰度、多样性以及组间肠道菌群组成差异。结果:1.炎症损伤相关评分:造模阶段第4天小鼠表现出精神萎靡、懒动、便中含血,OMT干预后小鼠活动增多,粪便含血量减少、体质量增加。与DSS组相比120mg/kg、60 mg/kg oxymatrine组DAI指数均显著下降（P＜0.05或P＜0.01）;与DSS组相比,OMT给药组小鼠结肠质量长度比显著升高,小鼠结肠质量系数、CMDI评分、HS评分极显著降低（P＜0.01）。2.ELISA检测相关指标含量:120mg/kg、60 mg/kg oxymatrine组与DSS组相比MPO、DAO、DLA含量减少（P＜0.05,P＜0.01）;OMT给药组血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量与DSS组相比均下降（P＜0.05,P＜0.01）。3.免疫印迹检测相关蛋白含量:OMT给药组与DSS组相比磷酸化p65、细胞核内磷酸化p65、TLR4、My D88含量减少（P＜0.01）;与DSS组相比120、60mg/kg oxymatrine组SIRT1含量显著升高,NLRP3、乙酰化HMGB1/总HMGB1、caspase-1p10/caspase-1p45含量均显著降低（P＜0.01）。4.肠道菌群检测指标:与control组相比,DSS组在科水平上Lachnospiraceae、Desulfovibrionaceae、Helicobacteraceae有一定减少,Enterobacteriaceae、Rikenellaceae有一定增加,在属水平上Lachnospiraceae＿NK4A136显著减少（P＜0.05）、Helicobacter有一定减少,Prevotellaceae＿UCG-001、Ruminococcaceae＿UCG-014有一定增加,OMT逆转这一变化。结论:1.OMT通过激活SIRT1维持HMGB1去乙酰化,抑制TLR4/MYD88/NF-κB通路的过度激活,进而抑制NLRP3炎症小体的激活,IL-1β、IL-6、TNF-α的释放和中性粒细胞浸润,减少细胞焦亡,改善UC炎症损伤。2.OMT可以影响肠道菌群组成,恢复肠道菌群丰富度和均匀度,缓解肠道炎症损伤程度。
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