【摘 要】
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本试验利用基因枪法和花粉管通道法两种植物遗传转化技术，将叶片衰老抑制基因PSAGI2-IPT导入有早衰现象的小麦品系9848,获得转基因植株。通过对基因枪法转化受体系统的建立和两种转化法的深入研究，初步建立起了一套完整的小麦转基因技术体系。主要研究结果如下：1.普通小麦基因转化中良好受体系统的建立:对影响小麦幼胚愈伤组织高频率再分化的条件进行了研究。2.基因枪转化的影响因素研究:用PDS-10
【机 构】
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本试验利用基因枪法和花粉管通道法两种植物遗传转化技术，将叶片衰老抑制基因PSAGI2-IPT导入有早衰现象的小麦品系9848,获得转基因植株。通过对基因枪法转化受体系统的建立和两种转化法的深入研究，初步建立起了一套完整的小麦转基因技术体系。主要研究结果如下：1.普通小麦基因转化中良好受体系统的建立:对影响小麦幼胚愈伤组织高频率再分化的条件进行了研究。2.基因枪转化的影响因素研究:用PDS-1000/He型基因枪将抑制叶片衰老基因PSAGI2-IPT转入小麦幼胚和愈伤组织中，通过对报告基因GUS瞬时表达的检测，研究了金粉用量、质粒DNA用量及轰击次数对转化率的影响。3.基因枪法转化:首次利用PDS1000/He基因枪将将带有NPT基因PASAGI2-IPT基因的质粒pCMLA35-1导人小麦9848的幼胚细胞和愈伤组织.然后在含有40mg/L卡那霉素的培养基上筛选农农与分化.从1870个幼胚和682块愈伤组织中分别获得65株和18株抗性绿苗。作PASAGI2-IPT基因的PCR扩增，只从转化未成熟幼胚来源的抗性植株中鉴定出2株阳性植株，平均转化率为0.107﹪，而从转化愈伤组织来源的抗性植株没有得到阳性植株。4.花粉管通道法转化:采用100，300，500，700ng/uL四种质粒DNA浓度，将带有NPTII基因PASAGI2-IPT基因的质粒pCMLA35-1通过花粉管通道途径转化小麦9848。结果表明：利用花粉管通道法对小麦进行遗传转化，当代小麦的结实率随质粒DNA浓度的升高明显降低；种子田间出苗率也随质粒DNA浓度的升高明显降低；500ng/uL质粒DNA浓度转化效果最好。在3111粒转化种子中，经卡那霉素筛选，得到96棵绿色抗性植株，提取这些抗性植株的叶片总DNA，作PASAGI2-IPT基因的PCR扩增，只鉴定出9棵阳性植株，平均转化率为0.29﹪。
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干旱不仅影响植物的生长发育，同时影响作物的产量及品质，干旱胁迫已成为作物减产，粮食危机最重要的非生物胁迫因素之一。中国西北内陆，年降水量少，农业用水紧张，因此急需培育抗旱性强的作物品种来节省水资源，从抗逆性较强的植物中克隆相关的抗逆基因也是解决此问题的一条重要途径。线果芥（ConringiaplanisiliquaL.）具有较强的抗逆性，系属十字花科线果芥属线果芥，短命植物（一年生、少数二年生草本
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