目的本研究采用慢病毒介导的RNA干扰技术,通过体外实验研究CRYAB(alphaβ-crystallin,晶状体蛋白αβ)基因沉默对胃癌细胞SGC-7901增殖与迁移能力的影响。方法1.构建靶向CRYAB基因特异性shRNA慢病毒载体并转染人胃癌细胞SGC-7901细胞株,荧光显微镜观察拍照检测转染效率;2.Real-time PCR和Western Blotting方法检测沉默CRYAB基因后CRYAB的mRNA和蛋白质水平;3.CCK-8法与细胞克隆球形成实验检测沉默CRYAB基因后细胞的增殖活性;4.Transwell迁移实验与细胞划痕实验检测沉默CRYAB基因后细胞的迁移能力。结果1.荧光显微镜观察结果显示,感染复数(MOI)值为20的SGC-7901细胞的病毒转染率大于80%;2.Real-time PCR与Western Blotting结果显示,成功转染sh RNA-CRYAB胃癌细胞SGC-7901细胞株。慢病毒转染72h后,与sh-ctrl组比较,sh-CRYAB组CRYAB mRNA水平减少90%;与sh-ctrl组比较,sh-CRYAB组CRYAB的蛋白表达显著降低(P<0.001);3.细胞克隆球形成实验显示,SGC7901细胞感染shRNA慢病毒的细胞克隆数明显较感染对照慢病毒组的克隆数少,两组比较具有统计学意义(P<0.05);4.CCK-8检测结果显示,SGC-7901细胞的增殖能力于CRYAB基因沉默之后显著减弱。与sh-ctrl组相比,sh-CRYAB组细胞增长速度变缓,在第4天、第5天增殖能力降低(P<0.05,P<0.01)。5.Transwell小室细胞迁移实验结果显示,转染CRYAB shRNA SGC-7901细胞的迁移能力明显下降。sh-CRYAB组平均穿膜细胞数是(49.5±2.0),sh-ctrl组平均穿膜数为(370.0±2.9),两组数据具有统计学差异性(P<0.01);6.细胞划痕实验结果显示,sh-ctrl组划痕基本被迁移的细胞覆盖,sh-CRYAB组的划痕仍比较清楚,测量两组0、24、48、72 h的相对空白面积,sh-CRYAB组细胞相对空白面积在24、48、72 h小于sh-ctrl组(P<0.01)。结论shRNA-CRYAB慢病毒干扰载体对抑制CRYAB基因于胃癌细胞SGC-7901中发生机制具有显著作用,进一步使细胞增殖与迁移受到抑制。CRYAB有望成为肿瘤基因治疗的新靶向分子。