低产乙醛啤酒酵母的选育

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乙醛是啤酒中含量最高的醛类物质,其含量高低直接影响了啤酒的品质。乙醛含量较高会给啤酒带来不愉快的青苹果和辛辣的青草味,造成其口感的不协调。另外,饮用乙醛含量较高的啤酒后,会引起“上头”等不舒适的生理反应。一般优质成熟的啤酒乙醛含量在2-10mg·L-1。啤酒中的乙醛主要是由酵母代谢而来,是糖代谢的中间产物。因此只有筛选低乙醛酵母,才能从根本上降低啤酒中的乙醛。本文建立了一种筛选低乙醛啤酒酵母的方法,并成功筛选到一株理想的低乙醛啤酒酵母D-A-14。首先对出发菌MI4进行紫外诱变处理,然后利用双硫仑-乙醇培养基筛选,最后对筛选到的优选菌进行高浓度乙醛连续驯养,最终得到目的菌株。该菌株生长性能良好,连续发酵5代后发酵性能稳定。为了考察目的菌株的发酵性能,分别对出发菌MI4和诱变菌D-A-14进行了500mL三角瓶发酵和200L中试发酵实验。结果表明,在三角瓶发酵实验中,诱变菌D-A-14乙醛含量达到3.81mg·L-1,比出发菌MI4降低了73.7%;在200L中试实验中,诱变菌D-A-14乙醛含量达到2.20mg·L-1,比出发菌MI4降低了60.6%。同时,诱变菌D-A-14的双乙酰,醇酯比及有机酸含量也有不同程度的降低,有利于啤酒风味的协调。上述实验结果表明出发菌MI4和诱变菌D-A-14的在某些发酵性能上有很大的变化,但是这些都是表型的差异。为了考察在代谢途径上具体是哪些基因的作用,同时对出发菌MI4和诱变菌D-A-14进行了DNA芯片实验,结果表明:与诱变菌相比,出发菌MI4中基因PDC1、PDC5及ADH2上调,基因ALDH2、ADH3及ADH7下调,推测出发菌MI4的乙醛含量应高于诱变菌株;出发菌MI4中基因GAL、PGK1、GPM1、GPM2、GPM3、ENO2及SUC2上调,基因PHO85、TIF3、IDH1、IDH2及MDH2下调,推测出发菌MI4的有机酸应高于诱变菌;出发菌MI4中基因BAP2上调,基因ILV1、ILV6、YAP5、LEU1、LEU2、BAT2及ATF2下调,推测出发菌MI4高级醇含量较高而酯含量较低。
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