【摘 要】
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目的:1.基于肝郁大鼠模型、肝郁叠加慢性肝损伤大鼠模型探讨“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”的客观性。2.基于肝郁叠加慢性肝损伤大鼠模型,从肝细胞凋亡及HPA轴角度探讨“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”的生物学机制。方法:1.“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”的客观性研究:基于药效学研究方法,分别复制肝郁大鼠模型及肝郁叠加慢性肝损伤大鼠模型,通过不同分组及先后给药的方式(疏肝、健脾、疏肝健脾、先疏肝,后
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目的:1.基于肝郁大鼠模型、肝郁叠加慢性肝损伤大鼠模型探讨“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”的客观性。2.基于肝郁叠加慢性肝损伤大鼠模型,从肝细胞凋亡及HPA轴角度探讨“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”的生物学机制。方法:1.“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”的客观性研究:基于药效学研究方法,分别复制肝郁大鼠模型及肝郁叠加慢性肝损伤大鼠模型,通过不同分组及先后给药的方式(疏肝、健脾、疏肝健脾、先疏肝,后疏肝健脾及先健脾,后疏肝健脾)复制“当先实脾”的治疗方法。从肝功能生化指标、肝脏组织病理学观察、胃肠粘膜屏障、胃肠激素指标的角度探讨《金匮》“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”的客观性。2.基于HPA轴及肝细胞凋亡的“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”生物学机制研究基于肝郁叠加慢性肝损伤大鼠模型,通过不同分组及先后给药的方式(疏肝、健脾、疏肝健脾、先疏肝,后疏肝健脾及先健脾,后疏肝健脾)复制“当先实脾”的治疗方法。采用Western blot、RT-PCR等分子生物学检测方法,以肝细胞凋亡及HPA轴为研究视角,探讨“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”的生物学机制。结果:1.“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”的客观性研究:首先,肝郁大鼠及肝郁叠加慢性肝损伤大鼠的一般情况、体质量变化趋势、血清肝功能生化、肝组织病理、胃肠粘膜屏障、胃肠激素指标均存在不同程度的异常改变,“见肝之病,知肝传脾”在以上两种模型中客观存在;各干预方式(疏肝、健脾、疏肝健脾、先疏肝,后疏肝健脾及先健脾,后疏肝健脾)对以上指标均存在不同程度的干预作用,“当先实脾”对以上指标的干预作用优于其他干预方式,“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”在以上两种动物模型中客观存在。其次,肝郁大鼠及肝郁叠加慢性肝损伤大鼠肝功能生化指标ALT及胃肠激素指标CCK的检测结果存在差异,其中肝郁叠加慢性肝损伤大鼠上述指标较正常大鼠存在显著差异,该模型更适合应用于“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”的机制研究。2基于肝细胞凋亡及HPA的“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”生物学机制研究肝郁叠加慢性肝损伤大鼠TUNEL荧光扫描结果显示不同视野下凋亡细胞显著增多;AI显著升高;Bax基因表达及Bax/Bcl-2较正常组显著升高,Bcl-2基因表达下调,但差异不显著;Bax及Bax/Bcl-2蛋白相对表达量显著升高,Bcl-2蛋白表达量降低但不显著;下丘脑CRH及血清ACTH、CORT含量显著升高。对比模型组,各给药组对以上指标均有不同程度正向调节作用,复制“当先实脾”的柴芍六君子汤丙组对各指标的综合调节作用最佳。结论:1.“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”有其科学客观性。2.“当先实脾”通过对肝细胞凋亡的直接调控,使促凋亡蛋白/基因Bax表达下调,上调抑凋亡蛋白/基因Bcl-2,从而干预肝病的发生发展,为“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”的生物学机制之一。3.“当先实脾”通过降低外周系统中CORT的含量,在防治“脾病”的同时,经过HPA轴的负反馈机制,降低下丘脑CRH的分泌,降低ACTH的分泌,进而减少CORT的分泌,抑制相关炎症基因的转录,从而达到有效治疗肝病的作用,是“见肝之病,知肝传脾,当先实脾”的生物学机制之一。
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