【摘 要】
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目的:探讨长链非编码RNA00238(long intergenic non-coding RNA00238,Linc00238)在乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)生活周期中的调控作用及可能的机制。方法:利用LincRNA芯片比较HBV阳性(HBV(+))与HBV阴性(HBV(-))肝组织样本中LincRNA表达差异,根据芯片结果,最终选择Linc00238为研究对象,r
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目的:探讨长链非编码RNA00238(long intergenic non-coding RNA00238,Linc00238)在乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)生活周期中的调控作用及可能的机制。方法:利用LincRNA芯片比较HBV阳性(HBV(+))与HBV阴性(HBV(-))肝组织样本中LincRNA表达差异,根据芯片结果,最终选择Linc00238为研究对象,real-time PCR验证Linc00238表达;利用过表达及RNA干扰,检测Linc00238对HBV复制、转录以及表达水平影响。利用双荧光素酶报告系统检测Linc00238对HBV启动子活性的影响。结果:LincRNA芯片在HBV(+)组织中共发现13条LincRNA表达发生变化,其中2条上调,11条下调,real-time PCR进一步证实Linc00238在HBV(+)肝组织样本中表达水平明显降低,在HBV稳定表达细胞系HepG2.2.15、HepAD38及HBV瞬时转染细胞模型中同样发现Linc00238表达下调,提示HBV感染抑制Linc00238表达。过表达Linc00238,HBV复制及蛋白表达水平明显减低,引入sh00238干扰Linc00238表达后,HBV复制及蛋白表达水平恢复(P>0.05);双荧光素酶报告系统显示,HepG2细胞共转染pHBs-luc、pHBx-luc、pHBc-luc及pCDNA-linc00238后的报告荧光与对照组无明显差异(P>0.05)。结论:通过体外研究发现Linc00238对HBV蛋白及DNA表达具有抑制作用,但研究进一步证实Linc00238不能通过影响HBV启动子活性抑制HBV表达与复制。
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