论文部分内容阅读
第一章 胶质瘤DNA-PK、Ku70／Ku86活性与化疗药物敏感性的关系研究
目的：探讨DNA-PK活性及其亚单位Ku70、Ku86活性和脑胶质瘤化疗药物敏感性的关系。
方法:原代培养36例人脑胶质瘤细胞，用MTT法检测其对6种不同抗癌药物的敏感性，以半数有效抑制浓度IC50或者血药峰浓度下的抑制率IR作为判断是否敏感的指标。提取同一胶质瘤组织标本的核蛋白质，用TECTDNA-Dependent Protein Kinase Assay System检测标本的DNA-PK活性；用Ku70／Ku86 DNA Repair Kit检测标本的Ku70／Ku86活性。
结论:胶质瘤标本的DNA-PK活性与胶质瘤级别有关，DNA-PK活性与DDP、VCR耐药性正相关；DNA-PK活性与Ku86活性正相关，但是与Ku70活性无关。Ku86活性与DDP耐药性正相关，但Ku70活性与DDP耐药性之间无显著相关。DNA-PK/Ku86活性高低可能是胶质瘤化疗敏感性的一个新的标记物。
第二章 丙戊酸对胶质瘤细胞株的增殖抑制作用、放化疗增敏作用及其分子机制研究
第一节丙戊酸对胶质瘤细胞株的抑制作用及其分子机制研究
目的：研究VPA对人脑胶质瘤细胞株增殖抑制、诱导细胞周期阻滞、凋亡的作用以及周期相关蛋白的变化。
方法:MTT比色法检测VPA对10株胶质瘤细胞株的细胞杀伤作用；流式细胞术检测其对细胞周期动力学及其对细胞凋亡的影响作用；Western Blotting法检测胶质瘤细胞株在VPA处理后乙酰化组氨酸H3(Acetyl-Histone H3)、乙酰化组氨酸H4(Acetyl-Histone H4)以及周期相关蛋白p16、p21、p27、cyclinD1表达量变化。
结论:VPA能够在体外抑制部分胶质瘤细胞生长，诱导出现细胞周期阻滞及凋亡，增加Acetyl-Histone H3、Acetyl-Histone H4蛋白水平，增加周期相关调节蛋白p16、p21、p27蛋白水平，降低cyclinDl蛋白水平。
第二节 丙戊酸对胶质瘤细胞株化疗敏感性试验研究
目的：探讨VPA是否能够体外增强DDP／TMZ对胶质瘤细胞株杀伤性。
方法:MTT法检测10株胶质瘤细胞(SF295、SKMG-1、UW28、SF767、T98-G、U87、UW28、UWR-7、U251、SKMG-4、MGR-2)对化疗药物DDP和TMZ的敏感性，计算药物对不同细胞的IC50值。MTT法检测VPA对DDP和TMZ的增敏作用，以增敏倍数ER的值作为判断增敏程度的指标。
结论:VPA增加胶质瘤细胞株SF295、SKMG-1、UW28、SF767对化疗药物DDP敏感性；增加细胞株U87、UWR7、UW28、SF767对化疗药物TMZ的敏感性。
第三节 丙戊酸对胶质瘤细胞株放疗敏感性试验研究
目的:探讨VPA体外对胶质瘤细胞株T98-G、SF295、U87放疗增敏作用及其相关分子机制。
方法:试验分为4组：对照组、药物处理组、照射组、药物处理联合照射组。流式细胞术检测其对细胞周期动力学及其对细胞凋亡的影响作用；WesternBlotting法检测胶质瘤细胞株周期相关蛋白表达量变化；克隆形成法检测细胞增殖存活能力的改变。
结论:VPA增加胶质瘤细胞株T98-G、SF295U87的放射敏感性。对于放射抗拒细胞T98-G、SF295能够促进其通过G2期；对于放射敏感性细胞L187则能够增加G2期阻滞，增大药物浓度促进其通过G2期。VPA能够抑制照射后细胞周期调控蛋白磷酸化chk1、chk2、cdc25C、cdc2水平，促进照射后DNA双链断裂增加。