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目的:探讨在体外将白癜风患者白斑患处成纤维细胞重编程为诱导成多功能干细胞(induced pluripotent stem cells,i PSCs)的可能性,并进行形态学及表观遗传学方面的鉴定。方法:(1)获得白癜风患者白斑组织,通过贴壁法取得皮损处成纤维细胞(vitiligo lesional fibroblast,VLF),包装含有Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc四种转录因子的逆转录病毒,感染VLF。在显微镜下观察感染病毒后VLF的形态变化。诱导至第12天后挑克隆传代;(2)对重编程出的细胞鉴定:碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)染色、细胞免疫荧光检测干性基因蛋白表达情况,实时荧光定量PCR检测内源性干性基因表达及外源性四因子表达,OCT4基因启动子区域去甲基化检测,染色体核型分析以及畸胎瘤形成分析试验。结果:1.重编程白癜风患者诱导多功能干细胞(1)重编程过程中第4天开始出现ES样克隆细胞,并且随培养天数增加长大,有自我生长能力;(2)传代后的VP-i PS(vitiligo patient specific-induced pluripotent stem cell,VP-i PS cell)细胞形状规则,细胞核排列紧密,细胞可见很高的核质比。2.鉴定白癜风患者诱导多功能干细胞(1)AP染色显示VP-i PS细胞为未分化状态;(2)细胞免疫荧光显示干性基因OCT4、NANOG、TRA-1-60、SSEA4蛋白水平表达阳性;(3)q RT-PCR检测内源性干性基因Oct4、Sox2、Nanog、h TERT、Rex1、DNMT3B、GDF3,与阴性对照比较表达水平显著升高(P<0.05),检测外源性四因子基因与阳性对照比较表达水平显著下降(P<0.05);(4)重亚硫酸盐测序显示VP-i PS细胞OCT4基因启动子区域为去甲基化状态,VLF细胞则为甲基化状态;(5)染色体核型分析显示VP-i PS细胞核型正常,未出现缺失等情况;(6)VP-i PS细胞可以在NOD/SCID小鼠体内形成畸胎瘤,具备向三个胚层分化的能力。结论:可以在体外将白癜风患者白斑患处成纤维细胞重编程为诱导多功能干细胞,并且具备干细胞表观遗传学特征及功能,为进一步研究干细胞治疗和白癜风提供了基础。