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大黄鱼(Pseudosciaena crocea Richardson)是浙江省沿海网箱养殖的主要品种之一。为了进一步搞清浙江沿海网箱养殖大黄鱼弧菌病的病原、发病症状及其流行规律,找到有效的防治方法,促进海水鱼类网箱养殖业健康、持续地发展,我们以浙江省宁波市的象山、奉化、宁海等地的养殖场为主延伸至玉环、温岭、舟山、平阳、洞头等地,通过实地考察、了解、采集有关病样、实验室研究等方法对海水网箱养殖大黄鱼的弧菌病进行了研究,研究内容包括该病的流行病学调查、病原菌株的分离鉴定、人工感染试验、超微病理研究、化学药物和中草药的抑菌作用、病原菌胞外产物的检测等,旨在为海水网箱养殖大黄鱼弧菌病的防治提供科学依据。
自1999年~2002年,跟踪调查了浙江省沿海12个大黄鱼养殖场大黄鱼弧菌病的发病情况。结果表明,该病在各个养殖场都有发生,流行时间为6~10月份,7~8月份为高峰期,一般死亡率为30~40﹪,高时可达80﹪以上。发病的原因主要是养殖密度过高、养殖海域环境条件恶化以及夏季高温使得弧菌大量增殖,从而诱发了疾病。在鱼体由于各种原因造成损伤时,加速、加重了疾病的爆发。
从症状典型的网箱养殖患病大黄鱼体内分离到2株可疑细菌715-4和824-1,经人工感染试验证实为是引起该病的病原菌。经形态、培养特征以及生理生化测试等鉴定,这2株致病细菌应归属于弧菌属的溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)。选取824-1菌株为代表,利用杯碟法研究了溶藻弧菌的胞外产物的性质。结果表明:溶藻弧菌的胞外产物具有淀粉酶、明胶酶、酪蛋白酶、卵磷脂酶、脂酶和几丁质酶活性以及溶血活性,其中以淀粉酶、明胶酶和酪蛋白酶的活性最强,但没有检测到脲酶活性。推测胞外产物在溶藻弧菌侵染大黄鱼时起到了一定的作用。
对患有典型弧菌病症状的养殖大黄鱼的主要组织进行了细胞病理学研究。结果显示,患病大黄鱼的肝脏、肾脏、脾脏等组织的细胞均出现不同程度的坏死现象,线粒体肿胀,线粒体嵴断裂,溶酶体大量增多,核变形,严重时整个细胞呈溶解状态。
研究了病原菌对20种化学疗剂的敏感性,结果表明:复方新诺敏、磺胺+TMP和庆大霉素等3种化学疗剂的抑菌作用较强,在此基础上测定了这3种化学疗剂对该菌的最小抑菌浓度(MIC)以及最小杀菌浓度(MBC),分别为1.96μg/cm3、(3.92+0.78)μg/cm3、7.84μg/cm3和3.92μg/cm3、(7.84+1.56)μg/cm3和15.68μg/cm3。同时测定了15种中草药对溶藻弧菌的MIC以及MBC值,其中以石榴皮、地榆、五味子、大黄等4种药物的抑菌能力最强,其MIC和MBC值分别为1:640、1:640、1:320、1:320和1:160、1:160、1:160、1:160,可作为防治该病的有效药物。