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研究背景:
盆腔器官脱垂(pelvic organ prolaspe,POP)是指盆腔器官和与其相邻的阴道壁突入阴道或自阴道脱出,是盆底支持结构缺陷、损伤与功能障碍造成的主要后果。POP和压力性尿失禁(stress urinary incontinence,SUI)同属盆底功能障碍性疾病。随着社会人口的老龄化,中老年妇女的POP是常见病,严重影响妇女的健康和生活质量,尤其是妨碍妇女的工作和社会活动,甚至有将POP称之为“社交癌”。2002年美国妇女健康研究调查发现,50-79岁的妇女中约40%有不同程度的POP,而2005年郎景和对中国的研究亦发现,大于60岁的妇女中POP的发病率接近25%。43%-76%POP的患者需要手术治疗,接受手术治疗的POP患者中有1/3需要再次手术治疗。上世纪90年代提出的“三个水平”理论、“吊床假说”和整体理论,为盆底支持结构的研究带来了飞跃性的进展。以往POP的治疗以手术治疗为主,即使手术的方法不断改进,但术后该病的复发仍然较高。近年涌现了不少有关POP的新观念、新理论,其中神经损伤学说也成为妇科泌尿学领域的研究热点。目前神经损伤的学说已为接受,电生理等多方面的研究发现,POP患者常伴有盆底神经的损伤,盆底的去神经支配在POP的发生中起着重要作用。盆底的神经纤维可分为运动纤维和感觉纤维,可分泌各种神经肽,盆底含有丰富的肽类,所以推测神经纤维的减少可减少神经肽的生成和释放,造成盆底血管改变,血流灌注不足导致肌肉萎缩变性,故有学者将神经肽作为损伤标记,并用神经肽研究盆底功能障碍性疾病的发病机制。既往在盆底功能障碍性疾病(pelvic floor dysfunction,PFD)的神经肽研究中,主要集中在SUI,也有涉及POP组的实验,但没有按POP疾病分期来分组研究,取材标本以肛提肌居多、也有子宫相关韧带、阴道粘膜。妊娠及阴道分娩后产妇盆底组织神经肌肉病理研究较详细,围绝经妇女是该疾病的高发人群,而围绝经妇女目前还是缺乏大样本量的盆底神经损伤的探讨。
本实验研究目的是以绝经前后的女性为对象,采用免疫组化及Western-blotting蛋白分析技术,检测神经肽:血管活性肠肽(Vasoactive intestinal peptide,VIP)及神经肽Y(Neuropeptide Y,NPY)在不同分期的POP患者的阴道前壁粘膜中的分布及表达情况,探讨神经肽与盆腔器官脱垂的关系以及在不同分期的POP合并SUI时,神经肽表达的变化。进一步明确盆底神经损伤对POP发生、发展的作用及意义。
材料与方法:
研究对象及实验分组
为2008年8月-2009年6月间在广东省人民医院妇产科确诊为盆腔器官脱垂的患者共41例及对照组(非盆腔器官脱垂、非压力性尿失禁的妇科良性疾病)的患者9例。按1995年美国Bump等提出POP量化分期系统(POP-Q)。将患者0期(POP-Q不能发现)设为对照组(9例);患者Ⅰ期(脱垂在-3~-1cm)设为POP-QⅠ组(8例);Ⅱ期(脱垂在-1~+1cm)设为POP-QⅡ组(10例);Ⅲ期(脱垂在+1~(tvl-2)cm)设为POP-QⅢ组(15例);Ⅳ期(脱垂在>(tvl-2)cm)设为POP-QⅣ组(8例)。
研究方法:
1.应用免疫组化检测5组50例患者阴道前壁靠近尿道口下方约3cm的阴道黏膜组织中VIP和NPY的分布及表达水平;
2.应用western-blot定量分析检测上述5组患者阴道前壁组织中VIP的含量。
3.统计分析:采用SPSS13.0软件,进行卡方检验、Spearman等级相关分析各组间两种神经肽(VIp、NPY)表达的差异以及POP分期的相关程度;多因素logistics回归分析年龄、绝经、产次、体重指数、是否合并SUI这5个致病因素与VIP与NPY表达水平的相关程度。
结果:
1.VIP免疫组化检测和western-blot的半定量分析结果相一致的。较之对照组,4组POP患者阴道前壁组织中VIP的含量、在前壁组织的表达水平和分布范围均明显降低(P均<0.001),各组降低的程度为POPⅣ组>POPⅢ组>POPⅡ组>POPⅠ组,VIP神经支配的降低程度与POP疾病的严重程度显著相关(r=-0.817,P<0.001)
2.NPY免疫组化检测发现4组POP患者阴道前壁组织中NPY的表达水平和分布范围均明显低于对照组(P均<0.05),各组降低程度的差异为POPⅣ组>POPⅢ组>POPⅡ组>POPⅠ组;NPY神经支配的降低程度与POP的疾病严重程度显著相关(r=-0.778,P<0.001)
3.POP组VIP和NPY表达水平的减少与年龄(r=-0.497,p<0.001)、与产次(r=-0.487,p<0.001)显著相关。
4.绝经与合并SUI两种致病因素与VIP和NPY的减少的相关程度有统计学意义的(P<0.05)。
5.除POPⅠ组外,POPⅡ、Ⅲ、Ⅳ组均可能合并SUI,而且合并SUI的比例并不随POP的疾病严重程度加重而上升。
6.POP合并SUI(Ⅱ、Ⅲ期患者)时,阴道前壁VIP、NPY的表达较不合并SUI的患者减少;而POP疾病程度最严重(Ⅳ期)时,无论是否合并SUI,VIP、NPY在阴道前壁的表达都是最少的。
结论:
1.随着POP的脱垂症状的加重,阴道前壁局部VIP和NPY在阴道前壁组织的表达会越发减少,提示神经肽支配的损伤在POP疾病的发生发展过程中起着重要的作用。
2.盆腔器官脱垂的多因素中绝经及合并SUI对POP的发生、发展比产次、年龄、体重指标等影响更为重要。