儿童过敏性哮喘特异性免疫治疗过程中IFN-γ/IL-4比值、FOXP3和CD4+CD25T细胞的变化

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目的过敏性支气管哮喘是气道慢性炎症性疾病,该病的确切发病机制仍不十分清楚,长期以来,Thl/Th2比例失衡理论已被多数人接受,认为过敏性哮喘是Th2细胞过度分化导致的变态反应性疾病。然而,传统的Thl/Th2比例失衡理论并不能解释所有的发病机制。对于哮喘的治疗,长期以来都是以抗炎、解痉为主。过敏原特异性免疫治疗(allergen specific immunotherapy, SIT)是唯一可能改变过敏性哮喘自然病程的对因治疗,但其机制仍不十分清楚。本文通过观察对尘螨过敏的儿童哮喘患者SIT的治疗效果和治疗前后外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)中FOXP3、IFN-γ、IL-4mRNA表达情况和CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25highT细胞占CD4+T细胞的百分比,研究它们在SIT中的作用,初步探讨儿童过敏性哮喘特异性免疫治疗的机制,从而为哮喘的防治提供新思路。方法本实验选取郑州大学第一附属医院儿科门诊40例过敏性哮喘患儿,男24例,女16例,平均年龄8.42岁。所有的病人都有明确的哮喘病史和症状,符合支气管哮喘诊断标准,皮肤点刺试验尘螨抗原阳性,采用Alutard屋尘螨变应原制剂(ALK丹麦)脱敏方法进行标准化脱敏治疗。根据其治疗时间分为SIT治疗前组、治疗1年后组和治疗2年后组三组。分别于治疗前、治疗1年后、治疗2年后采集外周静脉血。利用SYBR Green I荧光定量PCR的方法检测每组标本PBMCs中IFN-γ、IL-4和Foxp3 mRNA表达水平以及IFN-y/IL-4比值的变化;利用流式细胞技术检测每组标本CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25high T细胞分别占CD4+T细胞的百分比。结果采用统计学软件进行统计学分析。结果随着特异性免疫治疗的进行,IFN-γ/IL-4比值逐渐升高,治疗1年后升高为治疗前的5倍,治疗2年后升高为治疗前组的3倍。FOXP3 mRNA相对表达量治疗1年后显著升高,为治疗前的4.4倍;治疗2年后与治疗1年后相比有所下降,但仍为治疗前的1.9倍。CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的百分比在特异性免疫治疗前后无显著差异(P>0.05);CD4+CD25high T细胞占CD4+T细胞的百分比在特异性免疫治疗后1年显著增高(P<0.05),治疗后2年仍维持高水平。结论随着特异性免疫治疗时间的延长,IFN-γ/IL-4的比值逐渐升高,提示特异性免疫治疗中Th1/Th2细胞失衡得到一定的纠正。Foxp3 mRNA的表达水平和CD4+CD25high T细胞占CD4+T细胞的百分比均升高;提示Foxp3和CD4+CD25high T细胞可能在儿童过敏性哮喘特异性免疫治疗中起主要作用。
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