磷酸三(1,3-二氯异丙基)酯(TDCIPP)是一种合成有机磷阻燃剂,近年来被大量使用,广泛存在于水体环境中。TDCIPP暴露能够对斑马鱼产生生殖毒性、生长发育毒性和神经毒性等不良影响,但是其对斑马鱼肠道健康的影响却是未知的。近年来越来越多的研究表明化学品的暴露会导致鱼类肠道的损伤及肠道微生物的改变,而鱼类的肠道健康及肠道微生物又与鱼类的生长、发育和繁殖等生命活动密切相关。我们实验室前期研究结果表明,环境浓度的TDCIPP能够显著降低斑马鱼的体长体重,抑制斑马鱼的生长发育。本实验通过研究环境剂量的TDCIPP对斑马鱼肠道健康及肠道菌群的影响,探讨TDCIPP的生长发育毒性的可能机制。1.将斑马鱼胚胎暴露于环境剂量(0,30,300和3000 ng/L)TDCIPP中3个月,检测其对生长的影响,并使用HE(hematoxylin-eosin staining)染色观察肠道切片,并通过测量肠道氧化应激水平(氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx))、5-羟色胺(5-HT)、紧密连接蛋白ZO-2(TJP2)、乙氧基异戊二烯-O-脱乙基酶(EROD)和白介素-1β(IL-1β)含量,来评估TDCIPP暴露对斑马鱼肠道健康的影响。结果表明,TDCIPP显著降低了雌鱼的体重体长,但是对雄鱼无显著影响。同时,随着暴露浓度的升高,雌性斑马鱼的肠道损伤加重,主要表现在肠绒毛顶端的损伤、破裂甚至脱落,TJP2含量显著下降以及EROD活性的显著增加,但雄鱼肠道中除了与细胞膜保护相关的GPx酶活性升高外,其他指标均没有显著变化。我们的结果表明,TDCIPP暴露导致了雌性斑马鱼肠道的损伤以及生长的抑制。2.通过16s rRNA基因测序检测TDCIPP暴露对斑马鱼肠道微生物的影响,并进一步探究生长指标与肠道菌群之间的联系。结果表明,TDCIPP暴露显著增加了雄性斑马鱼肠道菌群物种丰富度和Alpha多样性,但是雌鱼却没有显著性变化。雄鱼肠道中肠道菌群的多样性增加可能是雄鱼一种免受肠道损伤的自我保护机制。进一步分析发现TDCIPP暴露增加了雌鱼肠道中的致病菌(军团菌属和黄杆菌属),相关性分析表明,军团菌属与体长成显著负相关,表明TDCIPP可能通过影响肠道菌落的组成进而抑制了雌鱼的生长发育。