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目的检测正常胃黏膜、肠上皮化生、不典型增生、胃癌及其转移淋巴结中Ezrin蛋白和c-Met蛋白的表达,并分析两者表达的差异性和关联性,探讨Ezrin蛋白及c-Met蛋白表达与胃癌发生和转移的关系及意义。方法临床病例资料及组织芯片制作:收集中国医科大学和辽宁省肿瘤医院2003年12月至2007年4月手术切除胃癌标本219例(其中188例同时于距癌灶边缘大于5cm处取配对正常胃黏膜作为对照)、不典型增生75例、肠上皮化生85例及胃癌转移淋巴结21例。采用组织芯片制作仪(美国)构建6个胃癌及其癌前病变、转移淋巴结的组织芯片蜡块,行4μm连续切片,其中一张行常规HE染色,其它室温保存备用。免疫组化染色及结果判定方法:采用Envision(PV-9000二步法)免疫组化方法检测正常胃黏膜、肠上皮化生、不典型增生、胃癌及转移淋巴结中Ezrin蛋白和c-Met蛋白的表达。鼠抗人Ezrin蛋白单克隆抗体(工作浓度1:200)购自NeoMarkers公司,兔抗人c-Met蛋白多克隆抗体(工作液)购自北京中杉金桥生物技术有限公司。已知阳性组织片做阳性对照,用PBS替代一抗作为阴性对照。结果判定方法:Ezrin蛋白和c-Met蛋白阳性反应均为定位于细胞浆的清晰、棕色或棕黄色颗粒。高倍镜下计数200个细胞,其中染色强度以阳性细胞的呈色反应为准:不着色0分,浅棕色1分,棕黄色2分,深棕色3分;再将染色阳性细胞所占的百分比打分:0分为阴性,1分为阳性细胞≤10%,2分为11-50%,3分为51-75%,4分为＞75%,染色强度和阳性百分比的乘积≥3分为特异性免疫反应阳性,按乘积分数将染色结果分为四个等级:-(0-2分),+(3-4分),++(6-8分),+++(9-12分)。结果除去抗原修复造成的部分组织脱落,最终可用病例为正常胃黏膜131例,肠上皮化生55例,不典型增生62例,胃癌182例,胃癌转移淋巴结21例。Ezrin蛋白和c-Met蛋白表达均定位于细胞浆。Ezrin蛋白在肠上皮化生(94.55%)、不典型增生(87.10%)和胃癌组织(83.52%)中的阳性表达率显著高于正常胃黏膜(61.07%),P＜0.01;胃癌Lauren分型中,Ezrin蛋白在肠型胃癌中的阳性表达率(93.51%)显著高于弥漫型胃癌(79.78%),P＜0.01。高分化管状腺癌中Ezrin蛋白阳性表达率(100%)显著高于中分化管状腺癌(91.23%)和低分化腺癌(78.21%),P＜0.01,r_k=0.186,有正相关趋势。伴淋巴结转移胃癌组Ezrin蛋白的阳性表达率(88.32%)显著高于无淋巴结转移组(68.89%),P＜0.01;Ezrin蛋白在21例胃癌原发灶(71.43%)和相应淋巴结转移灶(76.19%)的表达无显著差异,P＞0.05;Ezrin蛋白表达与患者性别、年龄、胃癌大体分型及浸润深度无显著关联,P＞0.05。c-Met蛋白在肠上皮化生(63.64%)、不典型增生(61.29%)和胃癌组织(65.93%)中的阳性表达率显著高于正常胃黏膜(28.24%),P＜0.01;胃癌Lauren分型中,c-Met蛋白在肠型胃癌中的阳性表达率(80.52%)显著高于弥漫型胃癌(59.55%),P＜0.01;高分化管状腺癌中c-Met蛋白阳性表达率(87.50%)显著高于中分化管状腺癌(78.95%)和低分化腺癌(60.26%),P＜0.01,r_k=0.286,有正相关趋势。伴淋巴结转移胃癌组c-Met蛋白的阳性表达率(71.53%)显著高于无淋巴结转移组(48.89%),P＜0.05;c-Met蛋白在21例胃癌原发灶(66.67%)和相应淋巴结转移灶(71.43%)的表达无显著差异,P＞0.05;c-Met蛋白表达与患者性别、年龄、胃癌大体分型及浸润深度无显著关联,P＞0.05。182例胃癌组织中Ezrin蛋白与c-Met蛋白的表达呈显著正相关,r_k=0.602,P＜0.01,在21例胃癌原发灶及相应淋巴结转移癌中两者的表达均密切相关,r_k分别为0.869和0.735,P＜0.01。Ezrin蛋白在肠上皮化生、不典型增生和胃癌组织的表达显著高于正常胃黏膜,提示其可能参与了胃癌的发生;Ezrin蛋白在肠上皮化生和肠型胃癌中的表达显著高于正常胃黏膜,且在肠上皮化生及肠型胃癌中的表达无显著差异,提示Ezrin蛋白可能参与胃黏膜肠上皮化生和肠型胃癌的发生。伴淋巴结转移胃癌组中Ezrin蛋白的表达显著高于无淋巴结转移组,提示Ezrin蛋白可能参与胃癌的转移。c-Met蛋白在正常胃黏膜的表达低于肠上皮化生、不典型增生及胃癌组织,在淋巴结转移胃癌组的表达高于无转移组,提示c-Met蛋白可能参与了胃癌的发生和转移。Ezrin蛋白与c-Met蛋白在胃癌组织及淋巴结转移癌中的表达均呈显著正相关,提示两者可能通过对Rho、PI3-K/AKT等信号转导通路的调节而共同参与调控胃癌的发生和转移。