罗格列酮诱导人胃癌多药耐药细胞裸鼠移植瘤中胃癌细胞凋亡的作用及其机制

来源 :南华大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:sally20095
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目的研究PPARγ激动剂罗格列酮能否逆转SGC7901/VCR细胞祼鼠皮下移植瘤对丝裂霉素(MMC)的耐药作用及其程度,从诱导肿瘤细胞凋亡方面初步探讨ROS逆转SGC7901/VCR多药耐药的作用及机制。方法收集人胃癌SGC7901/VCR细胞后接种于裸鼠背部皮下,观察移植后裸鼠的成瘤情况,筛选成瘤的裸鼠。术后两周将成瘤的裸鼠分为六组:空白对照组、生理盐水0.2ml.2d-1(A组)、丝裂霉素2.5mg.kg-1.2d-1组(B组)、罗格列酮100mg.kg-1.2d-1组(C组)、罗格列酮50mg.kg-1.2d-1+丝裂霉素2.5mg.kg-1.2d-1(D组)、罗格列酮100mg.kg-1.2d-1+丝裂霉素2.5mg.kg-1.2d-1(E组)、环孢霉素50mg.kg-1.2d-1+丝裂霉素2.5mg.kg-1.2d-1(F组)。每组8只裸鼠,待移植瘤长至大小约100mm3时开始分别给每组裸鼠灌胃给药(均为隔日一次),其中丝裂霉素腹腔注射给药,生理盐水、罗格列酮、环孢霉素灌胃。每6日分别测量每只裸鼠移植瘤的大小并给裸鼠称重,并据此绘制移植瘤的生长曲线;第40天后处死成瘤裸鼠,检测各组移植瘤的大小、重量,计算抑瘤率;DNA Ladder观察移植瘤组织的凋亡情况;Real -Time PCR检测P-Akt、Bcl-2、Bax mRNA表达; Western-blot检测P-Akt、Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果1、裸鼠体重:处死前各组裸鼠体重差别无统计学意义(P>0.05);2、用药后对移植瘤体积的影响:A组、B组移植瘤瘤体积差别无统计学意义(P>0.05),C组、D组、E组、F组与A组、B组比较移植瘤瘤体积差别有显著意义(P <0.05),以E组、F组移植瘤瘤体积最小;3、DNA Ladder结果显示:B组和A组无明显凋亡,C组存在弱的凋亡,MMC与ROS联用,随ROS剂量增加,凋亡明显增强,呈现明显的DNA梯度,E组略强于F组。4、用药后对移植瘤组织P-Akt、Bcl-2、Bax mRNA表达的影响: A组、B组P-Akt、Bcl-2 mRNA表达最强,B组与A组比较差异无显著性(P>0.05),C组、D组、E组、F组表达依次减弱,差别具有统计学意义(P<0.05),E组与F组表达最弱,E组与F组比较差异无显著性(P>0.05);Bax mRNA以A组表达最弱,B组与A组比较差异无显著性(P>0.05),C组、D组、E组表达依次增强,差别具有统计学意义(P<0.05)。E组与F组表达最强,E组与F组比较差异无显著性(P>0.05)。5、用药后对移植瘤组织P-Akt、Bcl-2、Bax蛋白表达的影响: A组、B组P-Akt、Bcl-2蛋白表达最强,B组与A组比较差异无显著性(P>0.05),C组、D组、E组表达依次减弱,差别具有统计学意义(P<0.05),E组与F组表达最弱,E组与F组比较差异无显著性(P>0.05);Bax蛋白以A组最低,B组与A组比较差异无显著性(P>0.05),C组、D组、E组表达依次增强,差别具有统计学意义(P<0.05)。E组与F组蛋白表达最强,E组与F组比较差异无显著性(P>0.05)。结论1、罗格列酮可抑制人胃癌SGC7901/VCR祼鼠移植瘤瘤体生长,诱导祼鼠移植瘤组织中SGC7901/VCR细胞的凋亡,且部分逆转其对丝裂霉素的耐药性;2、罗格列酮可部分逆转其对丝裂霉素的耐药性,其机制可能是通过下调PI3K/Akt信号通路中p-Akt、Bcl-2基因及蛋白和上调Bax基因及蛋白在裸鼠移植瘤组织中的表达,诱导SGC7901/VCR细胞凋亡有关;
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