普洱茶是我国云南的特色的茶叶种类,是我国六大类茶中黑茶的代表品种,属于后发酵茶。随着普洱茶市场的发展和人们对食品、饮品健康价值的关注,普洱茶成分及保健功能的研究得到深入发展。通过国内外学者的研究发现,普洱茶在降压、降脂、降糖、防止动脉硬化、抗疲劳、抗感冒、抗出血、抗癌、抗肝炎等方面都有较为明显的功效。表明普洱茶中化学成分有较为丰富的生物活性。由于普洱茶属于后发酵茶,其加工工艺对茶中化学成分的变化有着重要影响。渥堆是普洱茶加工中的关键工艺,而茶色素是普洱茶经过渥堆后所产生的特殊成分,随着渥堆时间的延长,茶色素中茶黄素和茶红素的含量逐渐降低,而茶褐素的含量逐渐升高,成为普洱茶中含量最高的茶色素。一般认为,茶褐素是后发酵过程中,茶黄素、茶红素继续氧化形成的高聚合物,其结构极其复杂,目前并未完全探明,对其具体成分也尚未有定论。绿茶中EGCG是最重要的多酚类活性成分,对其生物活性的研究较详明。普洱茶与绿茶共同具有降脂功效,但具体起作用的有效成分并未明确,对茶褐素的研究也由于其结构不明,相对较少。目前,肠道菌群代谢研究主要集中在传统中药化学成分的研究上,并且以目前的研究结果显示,在肠道菌群作用下,原型物质能够代谢成为具有更好药理、毒理活性的代谢产物。本实验希望通过对普洱茶茶褐素和绿茶EGCG肠道菌群作用下代谢产物的对比分析,对普洱茶和绿茶共同具有降脂功效的原因进行探索研究。实验以实验室制备的普洱茶茶褐素和EGCG标准品为实验材料,进行离体肠道菌群代谢实验。运用UPLC、LC-MS进行检测,分析了茶褐素、EGCG在大鼠肠道菌群作用下的代谢产物。具体结论如下:(1)在肠道菌群作用下,EGCG能够代谢产生小分子酚酸类和儿茶素类的代谢产物。经过72小时的代谢作用,EGCG产生5种代谢产物,分别为没食子酸、3-O-甲基没食子酸或4-O-甲基没食子酸、对羟基苯丙酸及表儿茶素没食子酸酯。这些代谢产物相对稳定,且随着时间变化,产物得变化趋势有一定规律,符合代谢动力学模式。(2)在大鼠肠道菌群作用下,茶褐素的代谢产物有没食子酸、3-O-甲基没食子酸或4-O-甲基没食子酸、对羟基苯丙酸、儿茶素、没食子儿茶素或表没食子儿茶素、可可碱。但随时间的变化,其代谢产物并不稳定。(3)通过实验探索及结果分析,初步说明,普洱茶茶褐素和EGCG在肠道菌群作用下能够共同产生没食子酸、3-O-甲基没食子酸或4-O-甲基没食子酸、对羟基苯丙酸几种小分子酚酸产物。而普洱茶和绿茶能够同样具有减肥降脂功效的原因可能就是两种茶中的主要化学成分:茶褐素和EGCG,在肠道菌群的作用下,能够转化成相似或相同的代谢产物。(4)通过UPLC和质谱MRM定量检测,得到代谢过程中EGCG和没食子酸的变化规律。观察到EGCG在代谢24 h后迅速下降,没食子酸的含量在12 h前增幅明显,36 h后大幅下降。