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目的:肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是世界上最常见的癌症之一。有研究报道,泛素蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system,UPS)参与了蛋白质降解的调控,在HCC以及其他恶性肿瘤的病理生理学过程中扮演着关键角色。泛素接合酶E2Q1(ubiquitin-conjugating enzyme E2Q1,UBE2Q1)作为一种E2泛素接合酶类,可能参与了癌症相关蛋白的调控。本研究旨在分析UBE2Q1在HCC中的表达情况及其与HCC患者预后的关系,并进一步探讨UBE2Q1的异常表达在HCC发生发展过程中的意义。方法:1.从组织学角度研究,首先通过Western blot方法,检测在8对新鲜HCC及其对应的癌旁组织中UBE2Q1蛋白的表达情况;然后,运用免疫组化方法检测86例HCC组织标本中UBE2Q1和增殖指标Ki-67的表达情况,并采用统计学方法分析UBE2Q1、Ki-67的表达情况与HCC癌患者的性别、年龄、肿瘤体积大小、组织学分级以及肿瘤转移等临床病理因素之间的相关性。通过Kaplan-Meier法分析UBE2Q1的表达与HCC患者生存率之间的相关性;运用单因素和Cox危险比例模型多因素分析进一步探究UBE2Q1的表达与肝细胞肝癌患者预后之间的关系。2.从细胞学角度研究,选取高表达UBE2Q1的BEL-7404、Hep G2细胞株作为研究对象,血清饥饿释放同步化处理后运用Western blot方法检测UBE2Q1蛋白表达水平变化,探究其在肿瘤细胞增殖过程中的潜在作用。3.从分子生物学角度研究,通过小干扰RNA的方式下调BEL-7404、Hep G2细胞中UBE2Q1的内源性表达,然后采用CCK-8、细胞流式分析等方法检测UBE2Q1表达的下调对细胞增殖以及细胞周期的影响。结果:1.免疫组化及Western blot法检测均显示,UBE2Q1在HCC组织中的表达明显高于相对应的癌旁肝组织。统计学分析提示UBE2Q1的表达强度与HCC组织学分级(P<0.001)之间的关系有统计学意义,相关性分析表明UBE2Q1与Ki-67表达呈正相关(r=0.639,P<0.01);Kaplan-Meier分析显示UBE2Q1在HCC中的高表达与患者总生存率的降低显著相关(P=0.001);单因素分析表明UBE2Q1与HCC患者的不良预后有关(P<0.001);Cox比例风险模型分析显示UBE2Q1可做为HCC患者预后的一种独立指标(P=0.002)。2.通过血清饥饿的方式使BEL-7404、Hep G2细胞生长周期停滞,血清释放后刺激BEL-7404、Hep G2细胞增殖;Western blot结果显示UBE2Q1﹑PCNA蛋白随着细胞周期的进展表达增加,而p53、p21蛋的白表达却下降。3.si RNA分析显示,UBE2Q1表达的下调可引起BEL-7404、Hep G2细胞增殖水平的下降及其细胞周期的停滞。结论:1.UBE2Q1在HCC中高表达,并且可作为HCC患者一种独立的预后指标。UBE2Q1的高表达提示HCC患者的预后不良。上述结果均说明UBE2Q1可能与HCC的发生发展有关。2.UBE2Q1的表达在血清饥饿的BEL-7404、Hep G2细胞中逐渐增加,提示UBE2Q1与HCC细胞的增殖过程相关。si RNA干扰BEL-7404、Hep G2细胞中UBE2Q1的内源性表达后,p53、p21在BEL-7404、Hep G2细胞中的表达水平相应增加,提示UBE2Q1的表达下调可能通过使HCC细胞周期停滞来影响其增殖。