高糖诱导小胶质细胞JAK2/STAT3激活并增强共培养神经元Cav-1及NR2B的表达

来源 :温州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Kila5200
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目的:  通过观察高糖培养下BV2细胞中p-JAK2、p-STAT3的表达变化以及PC12细胞中p-Cav-1、p-NR2B的表达变化,探讨高糖对于小胶质细胞以及神经元的影响,以及JAK2/STAT3-Cav-1-NR2B信号通路在糖尿病神经病理性疼痛中的作用。  方法:  1.高糖刺激BV2细胞,将BV2细胞分为2组:正常组(C组)、高糖组(H组),分别给予低糖培养基(糖浓度为5.5mmol/L)、高糖培养基(糖浓度为33.3mmol/L)、培养24h后,采用蛋白免疫印迹(Western blotting)检测BV2细胞中p-JAK2、p-STAT3的表达变化。  2.给予JAK2抑制剂AG490,将BV2细胞分为4组:正常组(C-1组)、高糖组(H-1组)、抑制剂组(AG490-1组)、溶剂对照组(SC-1组),分别给予低糖培养基(糖浓度为5.5mmol/L)、高糖培养基(糖浓度为33.3mmol/L)、高糖培养基+AG490(50μmol/L)、高糖培养基+DMSO进行培养,24h后,采用蛋白免疫印迹(Western blotting)检测BV2细胞中p-JAK2、p-STAT3的表达变化。  3.利用transwell小室构建BV2细胞和PC12细胞共培养体系,随机分为5组:正常组(C-2组)、高糖组(H-2组)、抑制剂组(AG490-2组)、溶剂对照组(SC-2组)以及高糖对照组(HC-2组),前四组共培养体系分别给予低糖培养基、高糖培养基、高糖培养基+AG490(50μmol/L)、高糖培养基+DMSO,HC-2组仅用高糖培养基培养PC12细胞,24h后,采用蛋白免疫印迹(Western blotting)检测PC12细胞中p-Cav-1、p-NR2B的表达变化。  结果:  1.高糖刺激BV2细胞后:与C组相比, H组p-JAK2、p-STAT3的表达上调(P<0.05);  2.给予抑制剂AG490后,BV2细胞中:与C-1组相比,H-1组和SC-1组p-JAK2、p-STAT3的表达上调(P<0.05);与H-1组相比,AG490-1组的p-JAK2、p-STAT3的表达下调(P<0.05);H-1组的p-JAK2、p-STAT3表达与SC-1组比较差异无统计学意义。  3.共培养体系中的PC12细胞:与C-2组相比,H-2组的PC12细胞中p-Cav-1、p-NR2B的表达上调(P<0.05);与H-2组相比,AG490-2组PC12细胞中的p-Cav-1、p-NR2B的表达下调(P<0.05);HC-2组与C-2组相比较,p-Cav-1、p-NR2B的表达差异无统计学意义。  结论:  高糖引起BV2细胞中JAK2/STAT3表达的增加,进而引起PC12细胞中Cav-1、NR2B表达的增加。
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